操作视频|血浆凝固酶实验
【产品名称】
通用名称:冻干兔血浆
【包装规格】
0.5ml×10支
【预期用途】
用于金黄色葡萄球菌的血浆凝固酶试验(GB、SN标准)。
【检验原理】
细菌生成血浆凝固酶后释放于血浆中,称为游离凝固酶,不直接作用到血浆纤维蛋白原上,而是被血浆中的致活剂(即凝固酶致活因子)激活后变成耐热的凝固酶样物质,此物质纤维蛋白原变为固态纤维蛋白,血浆因而凝固。致病性葡萄球菌能产生凝固酶。
【主要组成成份】
冻干兔血浆、柠檬酸钠。
【储存条件及有效期】
1.2℃-25℃避光保存,环境湿度≤80%。
2.在储存条件下有效期为一年。
【样本要求】
样本的收集、储存、处理、运输应严格执行无菌操作,避免污染,
【检验方法】
方法1:按箭头方向掀开并撕下铝箔盖,每支西林瓶中加入0.5ml灭菌生理盐水轻微摇晃至完全溶解,然后加入0.3ml(SN))或0.2ml-0.3ml(GB)肉汤培养物,充分混合后,置36℃±1℃培养。
方法2:按箭头方向掀开并撕下铝箔盖,每支西林瓶中加入0.8ml肉汤培养物轻微摇晃至完全溶解,置36℃±1℃培养。
【参考值(参考范围)】
本品的空白对照应无菌生长。
【检验结果的解释】
每半小时观察一次,观察6 h,如呈现凝固(即倾斜或倒置时,呈现凝块)或凝固体积大于原体积的一半,被判定为阳性结果。
【注意事项】
1、可疑菌落需同时接种在5ml的BHI肉汤中和营养琼脂上
Baird-Parker平板上或血平板上的可疑菌落需同时接种在5ml的BHI肉汤中和营养琼脂上,如果出现可疑菌在BHI肉汤出现生长状态不良,菌液浊度不够的情况,可用营养琼脂上的菌落重新接种BHI肉汤进行活化。
2、必须使用新鲜的BHI肉汤培养物
血浆凝固酶实验必须使用新鲜的BHI肉汤培养物。“新鲜”应理解为,培养物从培养箱取出后,立即进行试验。以保证培养物的酶活力良好。避免出现因取出一段时间后,因酶活力降低而引起的假阴性。
3、加入BHI肉汤培养物后,要轻轻转动瓶身至混合均匀
兔血浆中加入BHI肉汤培养物后,要轻轻转动瓶身至混合均匀,不要采取剧烈摇晃的方式。
4、试验应每半小时观察一次
不可直接观察第6h后的结果。一些金葡菌能够产生蛋白酶来分解纤维蛋白,而出现先凝集而后消融的情况,保证每半小时观察一次,防止因观察不及时,而误判成假阴性。观察凝固情况时,采用将西林瓶缓慢倾斜或倒置的方式。切记不要采用摇晃的方式进行观察!当凝固体积大于原体积一半,即可判为阳性。
结果判断:
编号
产品名称
结果判断
培养时间
备注
阳性
阴性
HB4117-4
兔冻干血浆
全凝或凝固体积大于一半
不凝固
2-6h
接种肉汤培养物0.3ml于安瓿瓶内,充分混合,
置36±1℃培养,定时观察是否有凝块形成。
血浆凝固酶实验操作视频:http://www.hopebiol.com/asphtml/video44.htm
不同细菌在冻干兔血浆上的生化反应:
冻干兔血浆微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养2-6小时。