一、实验原理:
用于蜡样芽孢杆菌的固体平板计数。 蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子;D—甘露醇为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂;卵黄含有卵磷脂,蜡样芽孢杆菌产生卵磷脂酶,在菌落周围产生沉淀环;并发酵D—甘露醇产酸使菌落显红色;多粘菌素B可抑制杂菌的生长。
二、试验方法:
称取本品4.6g,加热溶解于100ml蒸馏水中,经121℃高压灭菌15分钟,待培养基冷却至50℃时,每瓶加入50%卵黄乳液5ml及多粘菌素B 10000 IU ,摇匀 ,倾入无菌平皿。临用时制备不得超过3小时。
使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。
1、制备质控菌液
2、将质控菌液划线或涂布于平板上。
3、30±2℃需氧培养24-48小时,记录实验结果。
三、结果判定:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
蜡样芽胞杆菌 |
CMCC 63303 |
PR>0.7 |
淡红色菌落,有沉淀环 |
蜡样芽胞杆菌 |
CICC 21261 |
PR>0.7 |
淡红色菌落,有沉淀环 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
- |
抑制 |
枯草芽孢杆菌 |
CMCC 63542 |
+++ |
黄色菌落,无沉淀环 |
图1 MYP琼脂微生物质控结果
备注:a:蜡样芽孢杆菌CMCC63303,b:蜡样芽孢杆菌CICC21261,c:大肠埃希氏菌,d:枯草芽孢杆菌
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