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鞭毛染色方法的简介



录入时间:2020-4-30 11:20:39 来源:青岛海博生物

(一)染剂

   1.甲液

丹宁酸

5.0g

FeCl3

1.5g

福尔马林(15%)

2.0ml

NaOH(1%)

1.0ml

蒸馏水

100ml

 

   2.乙液

 

AgNO3

2.0g

蒸馏水

100ml

 

   待AgNO3溶解后,取出10 ml备用,向其余的90 ml AgNO3液中滴加浓氢氧化铵,则形成很浓的沉淀,再连续滴加氢氧化铵到刚溶解沉淀成为澄清溶液为止,再将取出的AgNO3液慢慢滴入,出现薄雾,经轻摇后薄雾消失,继续滴入AgNO3液直至薄雾刚不消失为止。

 

(二)玻璃片准备

 

   选择光滑无痕纹玻片,先用国产SDS液煮沸,为了充分接触,将玻片置特制玻片架,煮沸30 min,然后冷却,再放入洗液,浸泡过夜,用水冲去残酸,最后用蒸馏水冲洗,沥干水,再放入95%乙醇脱水,取出玻片,以火焰去乙醇,立即使用。

 

(三)菌种准备

 

   需用新的培养物,一般用新制备斜面,接种后16-24h为宜。如长期未移种,最好先连续移种活化2~3次。

 

(四)染色步骤

 

   (1)涂片:在载玻片的一端滴一滴蒸馏水,用接种环挑取斜面上少许菌苔(注意不要挑上培养基),在载玻片的水滴中轻沾几下,将玻片倾斜,使菌液缓慢流到另一端,然后平放在空气中干燥。

   (2)涂片干燥后,滴加甲液染10min,用蒸馏水冲洗,干燥或将残水沥干或用乙液冲去残水后,加乙液染30-60s,加热,使其稍冒蒸气而染液不干,冷却后用蒸馏水冲洗。

 

(五)结果观察

 

   镜检时多观察几个视野,菌体为深褐色,鞭毛为褐色。

 

(六)注意事项

 

   (1)染液最好当日配制,次日使用效果差,染出的鞭毛色浅,一般第三日不能再使用此液。此法染鞭毛适于染较多的菌株。

   (2)一定要充分洗净甲液后再加乙液,否则背景很脏。

   本文节选自《常见细菌系统鉴定手册》第十二章。

 

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