判定试验菌是否有运动性的方法

（一）半固体琼脂穿刺法

  根据有鞭毛的细菌可以在半固体培养基中游动却又不能任意游走的现象，观察细菌生长情况，判定试验菌是否有运动性。可使用试验菌能良好生长的培养基，在其中加0.3%～0.6％的琼脂，（所用的琼脂量可因牌号不同而异）一般半固体培养基应是放倒试管不流动，而在手上轻轻敲打时琼脂即破裂为宜。对一般常见细菌可结合葡萄糖氧化发酵试验观察运动性。

  用直针穿刺接种试验菌于半固体培养基内，适温培养。细菌的运动性可用透射光目测。如生长物只生长在穿刺线上，边缘十分清晰，则表示试验菌无运动性；如生长物由穿刺线向四周呈云雾状扩散，其边缘呈云雾状，则表示试验菌株有运动性。对生长快的细菌应培养1天后观察。如第一天不能判定可在第2～3天再观察。如2～3天时仍不能判定是否有运动性，可延迟5～6天再观察一次。因为游动力弱的细菌，在半固体培养基中第1～2天中尚不能从穿刺线游开，故需多培养几天观察。如试验菌在半固体培养基中产气，气泡会将穿刺线上的生长物的扩散情况，不可误将不运动的细菌判为有运动性。如试验菌是好氧细菌，穿刺线上生长物很少，可检查从培养基表面向下渗人的生长物的情况。

（二）镜检法

  用显微镜检查细菌细胞是否能游动，可用普通显微镜或相差显微镜检查。用普通显微镜时光线不宜太强，要适当减弱。检查时应注意以下几点：

  1.细菌细胞间有明显位移者，才能判定为运动性。由于细菌细胞太小，在悬液中有布朗运动，即每个细胞均在原地颤动，彼此的位置关系却没改变， 切不可将这种现象误判为具运动性。 由于载片与盖片之间悬液过多，在使用油浸物镜调焦时，悬液在盖玻片下流动。这时可看到大批细菌细胞都以同一速度向同一方向运动，这也不是真正的运动性。真正的运动性应是细菌细胞彼此的位置关系明显的改变。细菌的运动性因种或菌株而异。有的运动迅速，有的运动缓慢。能运动的菌株也不一定每个细胞都同时运动，常常是大多数细胞不运动。少数细胞明显运动。

  2.有些细胞不以鞭毛运动而是滑动。镜检时应注意与游动区分开。一般游动速度高，滑动则迟缓。游动只能在悬液中运动，滑行则须附在固体表面进行。

  3.如室温太低，以致载物台温度太低。有的细菌会因温度太低而不能运动，应设法提高载物台或载玻片的温度，达到试验菌能运动的温度（如在室温较高的试验室镜检，或将载玻片放置保温箱中一会儿再观察）。

  4.镜检好氧菌时，则可能因盖玻片下供氧不足而使试验菌不能表现出运动性，遇到这种情况则应使盖玻片下残留一二个小气泡，镜检气泡四周或盖片边缘处的细菌运动性。

  5.用油镜检时，盖玻片的厚度以不超过0.17mm为宜。用过厚的盖玻片时，调焦有困难。用相差油镜观察时载玻片的厚度约为1.2mm为宜。

  本文节选自《常见细菌系统鉴定手册》第十二章。

上一篇：鞭毛染色方法的简介

下一篇：特殊的芽孢染色法简介