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特殊的芽孢染色法简介



录入时间:2020-5-6 14:00:20 来源:青岛海博生物

   芽孢通常可在革兰氏染色片中看到,但在不易清晰观察时,可用特殊的芽孢染色法,使芽孢与菌体分别呈现不同颜色,便于观察。

 

(一)孔雀绿染色法

 

   (1)将生有芽孢的斜面菌苔按革兰氏染色法涂片后用饱和的孔雀绿(Malachite green)水溶液(约为7.6%)染10min

   (2)用自来水冲洗

   (3)用0.5%番红液复染30s

   (4)水洗,吸干

   (5)镜检:芽孢呈绿色,菌体和芽孢囊呈微红色,但应注意菌体中有异染粒时,也可呈现绿色。

 

(二)石炭酸复红染色法

 

   1.染剂

 

   (1)石炭酸复红液

碱性复红(Basic Fuchine,一品红)


乙醇饱和液(约10%)

10ml

石炭酸水溶液(5%)

100ml

    

    两液相混摇匀备用。

 

   (2)酸性乙醇

乙醇(95%)

100ml

浓酸盐

3ml

 

   (3)吕氏美蓝染液

美蓝(次甲基蓝、亚甲蓝、甲烯蓝、Methylene blue)

乙醇饱和液(约2%)

30ml

KOH水溶液(0.01%)

100ml

KOH 1%溶液1 ml加水99 ml即为0.015的KOH

    

    将两液混合后备用,此液陈旧者更好。

 

   2.染色步骤

 

   (1)按常规涂片。

   (2)滴加石炭酸复红于涂片上,并于玻片下缓缓加热,使染液冒蒸气但不沸腾,并继续滴加染液,不使涂片上染液蒸干,这样保持5 min。

   (3)涂片冷后,倾去染液,用酸性乙醇脱色至无红色染剂洗脱为止。

   (4)彻底水洗。

   (5)用吕氏美蓝复染2~3 min。

   (6)水洗、吸干、镜检。

 

   3.观察结果

 

    镜检时,菌体及孢囊呈蓝色,芽孢呈红色。

    本文节选自《常见细菌系统鉴定手册》第十二章。

 

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