1.试剂
盐酸二甲基对苯撑二胺（或四甲基对苯撑二胺）1％水溶液于茶色瓶中在冰箱中贮存。
2.操作
在干净培养皿里放一张滤纸，滴上二甲基对苯撑二胺的1％水溶液，仅使滤纸湿润即可，不可过湿。用白金丝接种环（不可用镍铬丝）取18-24 h的菌苔，涂抹在湿润的滤纸上，在10s内涂抹的菌苔现红色者为阳性，（四甲基对苯撑二胺呈蓝色）10～60s现红色者为延迟反应，60s以上现红色者不计，按阴性处理；
3.氧化酶试纸制作及测定法
将质地较好的滤纸（如新华1号滤纸）用1％盐酸二甲基对苯撑二胺浸湿，在室内悬挂风干。干后，剪裁成适当大小的纸条，放在有橡皮塞的试管中密封保存，在4℃冰箱中可存数月，使用前用白金丝接种环将菌苔抹在纸条上，于10s内出现红色为氧化酶阳性。如纸条储存过久，颜色不明显，则不宜使用。
4.操作注意事项
（1）二甲基对苯撑二胺溶液易于氧化，一般可于冰箱中贮存二周。如溶液颜色转红褐色，则不宜使用。
（2）铁、镁等金属可催化二甲基对苯撑二胺呈红色，故不宜用电炉丝或铁丝等取菌苔。如无白金丝，可用玻棒或灭菌牙签取菌苔涂抹。
（3）在滤纸上滴加试液以刚刚湿润为宜。如滤纸过湿，妨碍空气与菌苔接触，则延长显色时间，造成假阴性。
本文节选自《常见细菌系统鉴定手册》第十三章。
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