1.培养基
蛋白胨 |
5g |
明胶 |
100~150g |
水 |
1000ml |
pH7.2-7.4,分装试管,培养基高度约4~5cm,间歇灭菌或115℃蒸气灭菌20min
2.接种
取18~24h的斜面培养物穿刺接种,并有两支未接种的空白对照。
3.结果观察
于20℃温箱中培养,2,7,10,14,和30天。在20℃以下的室温观察的生长情况和明胶是否液化。如菌已经生长,明胶表面无凹陷且为稳定的凝块,则为明胶水解阴性。如明胶凝块部分或全部在20℃以下变为可流动的液体,则为明胶水解阳性。如菌已经生长,明胶未液化,但明胶表面菌苔下出现凹陷小窝(须与未接种的对照管比较,因培养过久的明胶因水分失散也会凹陷)也是轻度水解,按阳性记录。若细菌未生长,则或是不在明胶培养基上生长,或是基础培养基不适宜。
4.注意事项
(1)如有的菌在20℃不生长,则在30℃培养 生长后,观察时放冰箱或冷水中降温待对照管凝固后再记录。
(2)灭菌过高或过低易影响结果,一般用115℃蒸气灭菌15min较为合适。
(3)明胶质量不一,在培养基中所用数量也难统一,以在20℃时凝固成稳定的凝块为宜,我们用天津试剂化工三厂的明胶,用量10%较为合宜。夏天明胶培养基不易凝固时,则用12%。为了便于比较,在同一实验室内,最好用同一牌号同一浓度的明胶。
本文节选自《常见细菌系统鉴定手册》第十四章。
上一篇:水解马尿酸
下一篇:硫化氢的测定