普通光学显微镜的使用

 微生物的最显著特点就是个体徽小，必须借助显微镜才能观察到它们的个体形态和细胞结构。熟悉显微镜和掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。本部分将介绍目前微生物学研究中最常用的普通光学显微镜及电子显微镜、相差显徽 
操作步骤
1 ．观察前的准备
( l ）显微镜的安置 显微镜于平整的实验台上，镜座距实验台边缘约3 一4 cm ．镜检时姿势要端正。
取放显微镜时应一手握住镜翻，一手托住胜座、使显橄翔保持直立、平稳。切忌用单手拎提；且不论使用单蔺显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观典，以减少眼叻使劳．也便干边观索边绘圈或记录．
( 2 ）光源调节安装在镜座内的光源灯可通过调节电压以获得适当的照明亮度，而使用反光镜采集自然光或灯光作为照明光源时，应根据光源的强度及所用物镜的放大倍数选用凹面或凸面反光镜并调节其角度，使视野内的光线均匀，亮度适宜。
( 3 ）根据使用者的个人情况，调节双筒显微镜的目镜双筒显微镜的目镜间距可以适当调节，而左目镜上一般还配有曲光度调节环，可以适应眼距不同或两眼视力有差异的不同观察者．侈）聚光器数值孔径值的调节调节聚光器虹彩光圈值与物镜的数值孔径值相符或略低，有些显微镜的聚光器只标有最大数值孔径值，而没有具体的光圈数刻度．使用这种显微镜时可在样品聚焦后取下一目镜，从镜筒中一边看着视野，一边缩放光圈，调整光圈的边缘与物镜边缘黑圈相切或略小于其边缘．因为各物镜的数值孔径值不同，所以每转换一次物镜都应进行这种调节．
2 ．显微观察
在目镜保持不变的情况下．便用不同放大倍数的物镜所能达到的分辨率及放大率都是不同的，一般情况下，特别是初学者，进行显微观察时应遵守从低倍镜到高倍镜再到油镜的观察程序。因为低倍数物镜视野相对大，易发现目标及确定检查的位1 , 
( 1 ）低倍镜观寮将金黄色有萄球菌染色标本玻片里于载物台上．用标本夹夹住，移动推进器使观察对象处在物镜的正下方．下降10 丫物镜，使其接近标本，用粗调节器怪怪升起镜筒，使标本在视野中初步聚焦，再使用细调节器调节图像清晰．通过玻片夹推进器慢，移动玻片，认真观察标本各部位，找到合适的目的物，仔细观察并记录所观察到的结果．
( 2 ）高倍镜观察在低倍镜下找到合适的观察目标并将其移至视野中心后，轻轻转动物镜转换器将高倍镜移至工作位置．对聚光器光圈及视野亮度进行适当调节后微调细调节器便物像清晰，利用推进器移动标本仔细观察并记录所观察到的结果．
( 3 〕 油镜观察  在高倍镜或低倍镜下找到要观察的样品区域后，用粗调节器将镜筒升高，然后将油镜转到工作位置。在待观察的样品区域加滴香柏油，从侧面注视，用粗调节器将镜筒小心地降下、使油镜浸在镜油中井几乎与标本相接。将聚光器升至最高位置并开足光圈，若所用聚光器的数值孔径值超过1 , O ，还应在聚光镜与载破片之间也加滴香柏油，保证其达到最大的效能．调节照明使视野的亮度合适，用粗调节器将镜简徐徐上升，直至视野中出现物像并用细调节器使其清晰准焦为止．．
3 显微镜用毕后的处理
( I ）上升镜筒，取下载玻片‘
( 2 ）用舞镜纸拭去镜头上的镜油，然后用擦镜纸蘸少许二甲笨〔 香拍油溶于二甲苯》 擦去镜头上残留的油迹，最后再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯。
切忌用手或井他纸报拭镜头．以免使镜头沾上污益或产生划液．影响观察．
实验报告
1 ．结果
分别绘出你在低倍镜、高倍镜和油镜下观察到的金黄色有萄球菌、枯革芽孢杆菌、链镶菌及青霉的形态，包括在三种情况下视野中的变化，同时注明物镜放大倍数和总放大率。2 ．思考题
( l ）用油镜观察时应注意哪些问题宁在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？
( 2 ）试列表比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作？
( 3 ）什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？
( 4 ）影响显微镜分辨率的因素有哪些呀
( 5 ）根据你的实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进行有效的观察．
  
   

 

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