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HBI大肠杆菌生化鉴定条使用方法

纪旭艳
录入时间:2020-6-30 9:42:12 来源:青岛海博生物

一、产品介绍

 

  产品用途:用于大肠杆菌IMViC试验鉴定。

  产品组成:包含靛基质试验(吲哚试验)、甲基红试验(MR)、V-P试验、西蒙氏柠檬酸盐利用试验四项生化反应。

  配套试剂:需配套使用Kovacs氏靛基质试剂、甲基红试剂、V-P试剂。

 

二、接种方法及结果记录

 

  1.实验准备:从包装盒中取出一条生化鉴定条,打开盖子,用打孔器开孔或直接把膜撕掉。如果染菌或变色,则不能使用,重新拿一条。注:打孔器用75%酒精擦拭后使用。

  2.接种方法:取一内盛2ml无菌水或无菌生理盐水试管,用接种针或接种环从营养琼脂平板上挑取1-2个菌落至无菌生理盐水中仔细研磨制成均一细菌悬液,每孔加入100uL菌悬液。

  3.接种完后做好标记,盖上盖子,放入底托中,放置36℃±1℃培养。

  4.结果记录:

  靛基质试验:培养18-24h后,滴加1-2滴Kovacs氏靛基质试剂,如有玫红色环出现,则记“+”(阳性),如为黄色环,则记“-”(阴性);

  甲基红试验(MR):培养24-48h后,滴加1-2滴甲基红试剂,如显红色,则记“+”,如显橙黄色,则记“-”;

  V-P试验:培养24-48h后,滴加V-P试剂A液3滴和B液1滴混匀,继续培养0.5-4h,如变红,则记“+”,如4h不变红或显橙黄色,则记“-”;

  西蒙氏柠檬酸盐:培养24-48h后,如出现变蓝色,则记“+”,如48h不变蓝色,则记“-”。

 

三、结果判定

 

  结果判定需参考《GB4789.38-2012食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数》。标准中对大肠杆菌的定义为:“广泛存在于人和温血动物的肠道中,能够在44.5℃发酵乳糖产酸产气,IMViC(靛基质、甲基红、VP试验、柠檬酸盐)生化试验为“++--”或“-+--”的革兰氏阴性杆菌”。

  因此,若待测菌在大肠杆菌生化鉴定条得出结果为“++--”或“-+--”,并且同时满足“能够在44.5℃发酵乳糖产酸产气”和“革兰氏阴性杆菌”两个条件,方可确定待测菌为大肠杆菌(可用EC肉汤培养基或乳糖发酵培养基鉴定待测菌是否能够在44.5℃发酵乳糖产酸产气,可用革兰氏染色法观察待测菌是否为革兰氏阴性杆菌)。

 

  注意事项:本产品仅用于测定大肠杆菌的IMViC试验,不能仅凭此鉴定条确证是否为大肠杆菌,必须同时结合乳糖发酵试验和革兰氏染色,可判断是否为大肠杆菌(如普通变形杆菌,IMViC试验结果虽与大肠杆菌相同,但乳糖发酵试验为阴性,以此进行排除)。

 

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