一、试验原理:
脑心浸液琼脂培养基营养丰富,可用于培养各种细菌。
牛脑浸粉、牛心浸粉、蛋白胨和酪蛋白胨作为培养基中的基础营养物质,提供细菌生长所需的碳氮源、维生素和其他的生长因子;磷酸氢二钠作为缓冲剂;葡萄糖作为可发酵的碳源;氯化钠维持菌体细胞正常生长所需的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L):
牛脑浸粉 |
4.0 |
牛心浸粉 |
4.0 |
蛋白胨 |
5.0 |
酪蛋白胨 |
16.0 |
氯化钠 |
5.0 |
葡萄糖 |
2.0 |
磷酸氢二钠 |
2.5 |
琼脂 |
13.5 |
pH值7.4±0.2 |
25℃ |
三、试验方法:
1.称取本品52.0g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15min,冷至55-60℃左右时,倾入无菌平皿,备用;
2.使用前,把制备好的平板放置室温10-20min;
3.制备质控菌液;
4.取100μL质控菌液涂布接种于待测培养基和TSA上;
5.放置36±1℃需氧培养18-24小时,记录试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。
注:回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
乙型溶血性链球菌 |
CMCC(B) 32210 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
无色小菌落 |
粪肠球菌 |
ATCC 29212 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
无色小菌落 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
无色大菌落 |
单增李斯特氏菌 |
ATCC 19114 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色小菌落 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
无色透明菌落 |
化脓性链球菌 |
ATCC 19615 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色小菌落 |
脑心浸液琼脂质控结果
A:大肠埃希氏菌;B:粪肠球菌;C:金黄色葡萄球菌;D:单增李斯特氏菌;E:化脓性链球菌;F:乙型溶血性链球菌
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