要研究微生物生长的过程,需要做定量测定,否则就没有量的概念。我们通常是测定群体生长的量,而不是只测一个细胞的生长。因为这样做一方面感到比较困难,另一方面其实用价值也不大。目前测定微生物群体生长 的方法不外乎两大类:一类是测定细胞物质量的增加,一类是测定细胞数 目的增加。
一、细胞量的测定
常用的细胞量测定法有下列3种:
1、干重法
该方法是将单位体积培养液中的菌体用清水洗净,然后放人干燥器 内加热或减压干燥,最后再用精密仪器测定其干重。一般说来,干重为湿重的20%—25% ,即1mg干菌=4—5mg ,湿菌=(4—5)*109个菌体。
2、氮量法
微生物细胞的含氮量一般 比较稳定,所 以常作为生长量的指标,如细菌含氮量一般约为菌体干重的14% 。利用微量定氮法测定细菌含氮总量,可换算出整个菌体的干重。
3、浑浊度法
此法为最常用的细胞测定法。这一方法的依据是:在一定范围内,小颗粒散射的光量与浓度成正比。光束穿过细菌悬浮液,通过的光量 由于散射而减少,因而可以作细胞密度测定。这种测定通常采用光电比色计或分光光度计进行。为提高本法的灵敏度,一是要使用短波光,二是要细菌浓度超过107个/ml。该方法要和标准 曲线结合运用才有意义。
另外,还有测定耗氧量或其他代谢产物来作为细胞量指标的。
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