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远藤氏琼脂培养基的原理和使用方法

林娇娇
录入时间:2020-9-18 10:05:31 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

 

 本培养基用于滤膜法测定生活饮用水及其水源水中的总大肠菌群。

 蛋白胨为微生物的生长提供氮源和维生素;乳糖为可发酵的糖类;琼脂是培养基的凝固剂;磷酸氢二钾为缓冲剂;亚硫酸钠和品红对革兰氏阳性菌有弱抑制作用,加入20mL无水乙醇可以提高培养基的抑菌性。亚硫酸钠可以使碱性品红还原脱色,大肠杆菌可以发酵乳糖产生乙醛和酸,乙醛与亚硫酸钠和品红化合物结合形成紫红色菌落,快速发酵乳糖的细菌使碱性品红结晶析出,菌落产生绿色金属光泽。

 

二、培养基配方(g/L):

 

蛋白胨

10.0

磷酸氢二钾

2.5

乳糖

10.0

无水亚硫酸钠

3.3

碱性品红

0.3

琼脂

12.5

pH 7.4±0.2       25℃

 

三、试验方法:

 

 1、称取本品39.0g,加入20 mL无水乙醇和980 mL蒸馏水中,加热搅拌溶解,121℃高压灭菌15 min,冷却后倾入无菌空平皿中,备用。

 2、制备质控菌液,接种到培养基平板上。

 3、放置36±1℃需氧培养24±2小时。

 

四、结果观察与解释

 

 接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24±2小时。

控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控结果

其它特征

大肠埃希氏菌

ATCC25922

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

紫红色菌落,有金属光泽

粪肠球菌

ATCC29212

/

/

半定量

G≤1

/

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC14028

/

/

定性

/

橙红色菌落

弗氏柠檬酸杆菌

ATCC43864

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

紫红色菌落,稍有金属光泽

大肠埃希氏菌

ATCC8739

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

紫红色菌落,有金属光泽

 

远藤氏琼脂培养基微生物质控结果

a:大肠埃希氏菌ATCC25922 b:粪肠球菌ATCC29212 c:鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028

d:弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864 e:大肠埃希氏菌ATCC8739



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 注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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