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尿素酶琼脂原理和使用方法

张辉
录入时间:2020-9-23 10:22:17 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

 

  尿素酶琼脂为生化培养基,用于细菌脲酶检测(GB、SN标准)。

  蛋白胨作为培养基中的基础营养物质,提供细菌生长所需的碳氮源、维生素和其他的生长因子;氯化钠维持培养基体系的渗透压平衡;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸二氢钾作为培养基的缓冲剂;酚红为pH指示剂,琼脂是培养基的凝固剂。有些细菌能产生尿素酶,将尿素分解,产生2个分子的氨,使培养基变为碱性,酚红呈粉红色。尿素酶不是诱导酶,不论底物尿素是否存在,细菌均能合成此酶。

 

二、培养基配方(g/L):

 

蛋白胨

1.0

氯化钠

5.0

葡萄糖

1.0

磷酸二氢钾

2.0

苯酚红

0.012

琼脂

15.0

pH值7.0±0.1

(25℃)


 

三、试验方法:

 

  称取本品2.1g,加热搅拌溶解于95mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷至50-55℃,加入无菌的40%尿素水5mL,混匀,分装试管,放成斜面备用。

 

四、试验结果判断:

 

  接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24±2小时。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

/

+++

变黄,阴性

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

/

+++

变黄,阴性

奇异变形杆菌

ATCC 14153

/

+++

变红,阳性

普通变形杆菌

CMCC(B) 49027

/

+++

变红,阳性

 

尿素酶琼脂质控结果

 

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