一、试验原理:
尿素酶琼脂为生化培养基,用于细菌脲酶检测(GB、SN标准)。
蛋白胨作为培养基中的基础营养物质,提供细菌生长所需的碳氮源、维生素和其他的生长因子;氯化钠维持培养基体系的渗透压平衡;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸二氢钾作为培养基的缓冲剂;酚红为pH指示剂,琼脂是培养基的凝固剂。有些细菌能产生尿素酶,将尿素分解,产生2个分子的氨,使培养基变为碱性,酚红呈粉红色。尿素酶不是诱导酶,不论底物尿素是否存在,细菌均能合成此酶。
二、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
1.0 |
氯化钠 |
5.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
磷酸二氢钾 |
2.0 |
苯酚红 |
0.012 |
琼脂 |
15.0 |
pH值7.0±0.1 |
(25℃) |
三、试验方法:
称取本品2.1g,加热搅拌溶解于95mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷至50-55℃,加入无菌的40%尿素水5mL,混匀,分装试管,放成斜面备用。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24±2小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
+++ |
变黄,阴性 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
/ |
+++ |
变黄,阴性 |
奇异变形杆菌 |
ATCC 14153 |
/ |
+++ |
变红,阳性 |
普通变形杆菌 |
CMCC(B) 49027 |
/ |
+++ |
变红,阳性 |
尿素酶琼脂质控结果
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