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卵黄氯化钠琼脂培养基原理及实验现象

赵宇
录入时间:2020-10-13 10:07:54 来源:青岛海博生物

一、实验原理


  蛋白胨、牛肉浸出粉提供氮源、维生素、生长因子;较高浓度的氯化钠可抑制大部分菌的生长;含有卵磷脂酶的葡萄球菌降解卵黄中的卵磷脂使菌落产生透明圈,而脂酶作用则产生不透明沉淀环;琼脂是培养基的凝固剂。


二、培养基成分(g/650ml)


蛋白胨

6.0

牛肉浸出粉

1.8

氯化钠

30.0

琼脂

14.0

pH 7.6±0.1 25℃

此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果


三、实验方法:


  1、称取本品51.8g,加热搅拌溶解于650ml纯化水中,121℃高压灭菌15分钟,冷至60℃左右时,以无菌操作加入10%氯化钠卵黄溶液100ml,混匀,倾入无菌平皿。

  2、制备质控菌液。

  3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

  4、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

  5、30-35℃倒置培养基培养24-72小时,记录实验结果。


四、结果观察及解释


  接种以下质控菌株,在30-35℃倒置培养基培养24-72小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控评定标准

其他特征 

大肠埃希氏菌

CMCC(B)44102

/

/

半定量

G≤1

/

金黄色葡萄球菌

CMCC(B)26003

50-100

TSA

定量

PR≥0.7

黄色菌落,周围有乳浊圈

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

50-100

TSA

定量

PR≥0.7

黄色菌落,周围有乳浊圈

  

   卵黄氯化钠琼脂培养基微生物质控结果:


五、注意事项


  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

 

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