一、培养基用途
用于动力观察,菌种保存,H抗原位相变异试验等。
二、培养基基础成分(g/L)
蛋白胨 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
琼脂 |
4.0 |
氯化钠 |
5.0 |
pH值7.4±0.1 |
25℃ |
三、试验原理
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、矿物质;氯化钠维持均衡的渗透压;较少量的琼脂作为培养基的凝固剂。
四、培养基用法
称取本品22.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸溶解,分装小试管,121℃高压灭菌15分钟,直立凝固,备用。
此溶液相当于多价鞭毛抗原(H)鉴定中,0.3%~0.4%半固体琼脂的小玻管中的溶液。
如需配置0.55%~0.65%半固体琼脂平板,需在每1000ml溶液中添加1.5~2.5g琼脂即可。
五、质控
(1)制备好的培养基,穿刺接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时。质控标准如下:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控结果 |
其他特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
>5000 |
/ |
定性 |
阳性,扩散生长 |
/ |
蜡样芽胞杆菌 |
CMCC(B)63303 |
>5000 |
// |
定性 |
阳性,扩散生长 |
// |
福氏志贺氏菌 |
ATCC12022 |
>5000 |
/ |
定性 |
阴性,沿穿刺线生长 |
|
宋内氏志贺氏菌 |
ATCC25931 |
>5000 |
/ |
定性 |
阴性,沿穿刺线生长 |
/ |
(2)质控菌株在该培养基中培养试验结果如下图:质控阳性菌除了在穿刺接种的穿刺线上生长外,在穿刺线的两侧均可见羽毛状或云雾状浑浊生长;质控阴性菌只沿穿刺线呈明显的线状生长。
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