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接菌后平板上无菌生长的原因解析

杨永帅
录入时间:2020-11-27 10:35:54 来源:青岛海博生物

  在我们用平板做实验的过程中,经常会遇到在给平板接种菌之后却没有菌落生长的情况。今天,我们就来分析一下出现这种情况的原因。本文将从菌种、人员操作、培养基和添加剂三个方面来分析。


一、菌种原因:


  1、菌种没有进行充分活化

  当我们拿到一株菌的时候,该菌种往往是处于一个保藏状态的,这就需要我们通过合适的培养基来逐代扩大培养,得到活力旺盛的菌株,所以充分活化的目的就是要让菌种逐渐适应培养环境,从而在平板上快速的长起来。


  2、菌种老化。

  菌种如果经过连续的频繁的传代达十几次甚至几十次,就会造成菌种老化,出现生长缓慢甚至不生长的情况。


  3、野生菌种。

  相比于标准菌株,有一些野生分离的菌种本身比较脆弱,对营养要求比较高,对外界不良环境也比较敏感,难以在普通的平板上长起来,往往需要加入特殊的营养物质。


  4、购买的商品化菌株

  有一些商品化的菌株,如益生菌、菌肥、可食用真菌等,本身进行过基因改造,不能进行连续传代扩大培养,因此在平板上难以长出来。


  5、样品中的菌

  有的样品中本身含菌量就较少,如水样、供试液等,接种量低造成平板上无菌生长。还有的样品中含有一些抑菌成分,会杀死样品中的菌,导致平板上无菌生长。


二、人员操作不当


  1、在实验操作过程中失误,特别是在稀释菌液过程中少接或者错接菌。


  2、培养基配置过程中称量错误,加入添加剂比例错误等。


  3、容器未洗刷干净,残留的抑菌成分导致菌不生长。


  4、过度灭菌,有很多培养基成分不耐高温,过度灭菌会导致成分失效。


  5、调PH值错误,不同温度下培养基的PH值也会不一样,未正确的调配PH值,也会导致菌不生长。


  6、未放置合适的培养条件,根据不同菌对氧气的需求程度,可以分为需氧、厌氧、微需氧培养等。根据不同菌对温度的需求,又可以在25度、30度、35度、42度、56度等不同温度下培养。


三、培养基及添加剂原因


  1、培养基及添加剂超过有效期或者临近有限期,营养成分存在一定程度的失效导致菌不生长。


  2、特殊培养基及添加剂未正确存放,未遮光、冷藏、严格密封保存等导致失效。


  3、培养基PH值发生改变,有一些特殊的成品培养基PH值随时间会存在一定程度的改变,在使用前需要对PH值重新进行调整,否则也会导致菌不生长。


  4、成品培养基本身质量不好,如原材料纯度不高、含有抑菌成分、原材料之间配比错误等都会导致成品培养基不合格。


  5、培养基及添加剂营养不够或者不适合培养某类菌种。有一些菌种本身营养要求比较特殊,需要添加某些特殊营养后才能生长。


  注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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