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葡萄球菌选择性琼脂110的实验原理及现象

刘凯凤
录入时间:2021-1-13 10:23:53 来源:青岛海博生物

一、选择性实验


  1.产品介绍


  葡萄球菌选择性琼脂110主要用于金黄色葡萄球菌的分离及培养。


  2.实验原理


  胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和氨基酸;D-甘露醇为可发酵的糖类;乳糖为金黄色葡萄球菌可利用的糖类;氯化钠用以维持反应体系的渗透压;磷酸氢二钾是缓冲剂;琼脂作用是培养基凝固剂。


  3.培养基配方


成分

用量(g/L)

胰酪蛋白胨

10.0

酵母浸粉

2.5

明胶

30.0

D-甘露醇

10.0

乳糖

2.0

氯化钠

75.0

磷酸氢二钾

5.0

琼脂

15.0

pH7.2±0.2

25℃


  4.实验方法


  ①称取本品149.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用;


  ②样品液按国家标准、SN标准、ISO标准或其它方法制备而成;


  ③取适量样品液涂布接种于已凝固好的葡萄球菌选择性琼脂110培养基平板上;


  ④将接好菌的平板倒置放入培养箱,于36±1℃培养18-24h,观察菌株生长情况。


  5.结果判断


  接种以下质控菌株,平板倒置放入36±1℃培养箱中,培养18-24h。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况

其它特征

金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

10-100

+++

生长良好,有明显菌落

金黄色葡萄球菌

ATCC 6538

10-100

+++

生长良好,有明显菌落

表皮葡萄球菌

CMCC 26069

10-100

+++

生长良好,有明显菌落

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

100-1000

-

生长抑制


  葡萄球菌选择性琼脂110微生物生长结果如图一。

a:金黄色葡萄球菌25923;b:金黄色葡萄球菌6538;c:表皮葡萄球菌26069;d:大肠埃希氏菌25922

图一

二、验证实验


  1.甘露醇发酵产酸实验


  配制0.04%的溴麝香草酚蓝指示剂滴加于菌落,如变为黄色,即为阳性。


  1.1实验原理及现象


  金黄色葡萄球菌可利用甘露醇产酸,溴麝香草酚蓝指示剂为pH指示剂(变色范围为pH值6.0~7.6),在酸性条件下显黄色,即溴麝香草酚蓝指示剂使金黄色葡萄球菌显示阳性实验结果如图二。


  2.明胶液化实验


  将硫酸铵饱和水溶液滴加于菌落,10分钟后,如围绕菌落出现一清晰带,即为阳性。


  2.1实验原理及现象


  金黄色葡萄球菌能产生明胶酶,使明胶分解为氨基酸,从而失去凝固力,即显示阳性实验结果如图二。


a:金黄色葡萄球菌25923;b:金黄色葡萄球菌6538

图二


三、注意事项


  1.本产品仅可用于科研实验。


  2.使用此培养基后续应辅助其他相关实验验证实验结果。

 

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