一、选择性实验
1.产品介绍
葡萄球菌选择性琼脂110主要用于金黄色葡萄球菌的分离及培养。
2.实验原理
胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和氨基酸;D-甘露醇为可发酵的糖类;乳糖为金黄色葡萄球菌可利用的糖类;氯化钠用以维持反应体系的渗透压;磷酸氢二钾是缓冲剂;琼脂作用是培养基凝固剂。
3.培养基配方
成分 |
用量(g/L) |
胰酪蛋白胨 |
10.0 |
酵母浸粉 |
2.5 |
明胶 |
30.0 |
D-甘露醇 |
10.0 |
乳糖 |
2.0 |
氯化钠 |
75.0 |
磷酸氢二钾 |
5.0 |
琼脂 |
15.0 |
pH7.2±0.2 |
25℃ |
4.实验方法
①称取本品149.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用;
②样品液按国家标准、SN标准、ISO标准或其它方法制备而成;
③取适量样品液涂布接种于已凝固好的葡萄球菌选择性琼脂110培养基平板上;
④将接好菌的平板倒置放入培养箱,于36±1℃培养18-24h,观察菌株生长情况。
5.结果判断
接种以下质控菌株,平板倒置放入36±1℃培养箱中,培养18-24h。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其它特征 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
10-100 |
+++ |
生长良好,有明显菌落 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
10-100 |
+++ |
生长良好,有明显菌落 |
表皮葡萄球菌 |
CMCC 26069 |
10-100 |
+++ |
生长良好,有明显菌落 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
- |
生长抑制 |
葡萄球菌选择性琼脂110微生物生长结果如图一。
a:金黄色葡萄球菌25923;b:金黄色葡萄球菌6538;c:表皮葡萄球菌26069;d:大肠埃希氏菌25922
图一
二、验证实验
1.甘露醇发酵产酸实验
配制0.04%的溴麝香草酚蓝指示剂滴加于菌落,如变为黄色,即为阳性。
1.1实验原理及现象
金黄色葡萄球菌可利用甘露醇产酸,溴麝香草酚蓝指示剂为pH指示剂(变色范围为pH值6.0~7.6),在酸性条件下显黄色,即溴麝香草酚蓝指示剂使金黄色葡萄球菌显示阳性实验结果如图二。
2.明胶液化实验
将硫酸铵饱和水溶液滴加于菌落,10分钟后,如围绕菌落出现一清晰带,即为阳性。
2.1实验原理及现象
金黄色葡萄球菌能产生明胶酶,使明胶分解为氨基酸,从而失去凝固力,即显示阳性实验结果如图二。
a:金黄色葡萄球菌25923;b:金黄色葡萄球菌6538
图二
三、注意事项
1.本产品仅可用于科研实验。
2.使用此培养基后续应辅助其他相关实验验证实验结果。
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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