一、用途
本产品用于大肠菌群的确证试验,非肠杆菌科细菌在此培养基中生长被抑制。
二、实验原理
蛋白胨提供微生物生长所需的碳氮源;乳糖是可发酵的糖类;煌绿是一种具有抑菌能力的染料,牛胆粉和煌绿抑制非肠杆菌科细菌。
三、培养基配方(g/L)
成分 |
含量(g/L) |
蛋白胨 |
10.0 |
乳糖 |
10.0 |
牛胆粉 |
20.0 |
煌绿 |
0.0133 |
pH7.2±0.1 |
25℃ |
四、实验方法
1.称取本品 40.0g ,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水(可根据培养需要扩大或缩小产品用量),分装到有倒立发酵管的 20mm*150mm 试管中,每管 10ml ,121℃高压灭菌 15 分钟,备用;
2.质控菌液按国家标准等标准或其它方法制备而成;
3.取相应菌液划线接种于已灭好菌的液体培养基中;
4.将接好菌的试管放入恒温培养箱,于36±1℃ 需氧培养24-48h,观察实验结果。
五、实验结果判断
1.外观
此干燥培养基呈绿色颗粒状态,高压灭菌后制备好的液体培养基为绿色透明无沉淀溶液。
2.生物学实验
接种以下质控菌株,放入培养箱中,于36±1℃培养24-48h观察试验结果。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
方法 |
质控情况 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
半定量 |
浑浊且产气 |
弗氏柠檬酸杆菌 |
ATCC43864 |
10-100 |
半定量 |
浑浊且产气 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
1000-5000 |
半定量 |
不浑浊不产气 |
粪肠球菌 |
ATCC29212 |
1000-5000 |
半定量 |
不浑浊不产气 |
沙门氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
半定量 |
浑浊不产气 |
煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)颗粒培养基微生物质控结果如图:
六、注意事项
使用此培养基后续应辅助其他相关实验验证。
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