MUGal培养基原理和使用方法

张辉
录入时间:2021-5-7 11:17:46 来源：青岛海博生物

一、大肠菌群简介

大肠菌群是指一群在37℃培养24h发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。主要由肠杆菌科中四个属内的一些细菌所组成，即埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属以及肠杆菌属。该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。

二、试验原理

MUGal培养基可用于大肠菌群快速检测。培养基中的胰蛋白胨作为培养基中的基础营养物质，提供细菌生长所需的碳氮源、维生素和其他的生长因子；氯化钠维持培养基体系的渗透压平衡；磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是培养基pH缓冲剂；月桂基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌；大肠菌群可产生β-半乳糖苷酶，分解液体培养基中的酶底物4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷MUGal，使4-甲基伞形酮游离，在波长366nm紫外灯照射下呈现蓝色荧光。

三、培养基配方（g/L）

胰酪蛋白胨	20.0
氯化钠	5.0
磷酸氢二钾	2.75
磷酸二氢钾	2.75
月桂基硫酸钠	0.1
MUGal	0.05
pH值7.0-7.2	25℃

四、试验方法

1.称取本品30.7g，加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中，分装于20mm×150mm试管中，每管9mL，116℃高压灭菌10分钟，待培养基冷却后，以无菌操作于每管培养液内加入0.1mL经无菌水稀释的500ug/ml头孢磺啶液，备用。

2.10倍梯度稀释法制备质控菌液。

3.选择合适稀释度的质控菌液100μL，接种到试管中，每一稀释度接种两个平行管；同时吸取稀释液100μL，接种到试管中作为空白对照。

4.放置36±1℃需氧培养24-48小时，记录试验结果。

五、试验结果判断

接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。

质控菌株	菌株编号	接种量（CFU）	方法	生长情况	其他特征
大肠埃希氏菌	ATCC25922	10-100	定量	+++	浑浊，产荧光
产气肠杆菌	CMCC(B)45103	10-100	定量	+++	浑浊，产荧光
鼠伤寒沙门氏菌	ATCC14028	10-100	定量	+++	浑浊，不产荧光
金黄色葡萄球菌	ATCC6538	100-1000	定量	-	抑制

MUGal培养基质控结果：

正常光线下

a:空白对照；b:大肠杆菌；c:产气肠杆菌；d:鼠伤寒沙门氏菌；e:金黄色葡萄球菌

366nm紫外灯照射下

a:空白对照；b:大肠杆菌；c:产气肠杆菌；d:鼠伤寒沙门氏菌；e:金黄色葡萄球菌

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