一、试验用途和原理
该培养基主要用于用于卫生环境表面微生物计数和分离培养。
胰蛋白胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供碳源；硫代硫酸钠、硫乙醇酸钠、亚硫酸氢钠、卵磷脂和吐温80为中和剂，可中和醛类消毒剂、含氯消毒剂、含碘消毒剂、季铵盐类消毒剂、过氧化物消毒剂等多种消毒剂的消毒作用；溴甲酚紫是酸碱指示剂；琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方（g/L)
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胰蛋白胨 |
5.0 |
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酵母粉 |
2.5 |
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葡萄糖 |
10.0 |
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硫代乙醇酸钠 |
1.0 |
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硫代硫酸钠 |
6.0 |
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亚硫酸氢钠 |
2.5 |
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溴甲酚紫 |
0.02 |
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卵磷脂 |
7.0 |
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琼脂 |
15.0 |
| pH值7.6±0.2 | 25℃ |
三、试验方法
1.称取本品49g，另取吐温-80 5g加入，混匀，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水，分装，121℃高压灭菌15分钟后，将灭菌完毕的培养基倾入无菌平皿中，备用。
2.将质控菌株稀释至合适梯度，使最终细菌含量为100-1000CFU/mL。
3.用移液枪吸取质控菌株100μL加入备用的平皿中，涂布使菌液在培养基表面均匀涂开。
4.将接好菌种的培养基放置于36±1℃需氧环境中倒置培养40-48小时。
四、实验结果
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU) |
参比或计数培养基 |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
TSA |
≥70% |
+++ |
黄色菌落 |
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金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
10-100 |
TSA |
≥70% |
+++ |
黄色菌落 |
|
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
TSA |
≥70% |
+++ |
黄色菌落 |
|
铜绿假单胞菌 |
ATCC27853 |
10-100 |
TSA |
≥70% |
+++ |
紫色菌落 |
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枯草芽孢杆菌 |
ATCC6633 |
10-100 |
TSA |
≥70% |
+++ |
紫色菌落 |
D/E中和琼脂实验结果：
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大肠埃希氏菌 黄色菌落 |
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金黄色葡萄球菌 黄色菌落 |
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鼠伤寒沙门氏菌 黄色菌落 |
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铜绿假单胞菌 紫色菌落 |
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枯草芽孢杆菌 紫色菌落 |
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五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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