一、培养基用途
用于双歧杆菌的分离培养(GB标准)。
二、培养基成分及使用方法
1.培养基成分(g/L)
蛋白胨 |
5.0 |
肝浸粉 |
4.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
酵母浸粉 |
2.0 |
胰酪蛋白胨 |
5.0 |
可溶性淀粉 |
0.5 |
L-半胱氨酸 |
0.5 |
葡萄糖 |
10.0 |
磷酸氢二钾 |
1.0 |
磷酸二氢钾 |
1.0 |
大豆胨 |
3.0 |
硫酸镁 |
0.2 |
硫酸亚铁 |
0.01 |
氯化钠 |
0.01 |
硫酸锰 |
0.0067 |
吐温80 |
1.0 |
琼脂 |
20.0 |
pH7.2±0.1 |
25℃ |
2.使用方法
称取本品56.23g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,冷却至合适温度,倾入无菌平板。
三、原理
蛋白胨、肝浸粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、胰酪蛋白胨和大豆胨提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;氯化钠维持均衡的渗透压;硫酸锰、硫酸镁、硫酸亚铁可提供双歧杆菌生长的微量元素;L-半胱氨酸为还原剂,辅助培养基维持厌氧环境,有利于厌氧菌的生长;磷酸氢二钾和磷酸二氢钾做缓冲剂;吐温80可促进双歧杆菌的生长并能中和一些有毒成分;琼脂是培养基的凝固剂。
四、实验结果
1、按使用方法制备培养基,接种以下质控菌株,在36±1℃厌氧培养48-72h。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
婴儿双歧杆菌 |
CICC6090 |
/ |
/ |
划线接种 |
生长良好 |
/ |
长双歧杆菌 |
CICC6068 |
/ |
/ |
划线接种 |
生长良好 |
/ |
短双歧杆菌 |
/ |
/ |
/ |
划线接种 |
生长良好 |
/ |
2、婴儿双歧杆菌在培养基上厌氧培养48h后的生长状况如图所示。
BL琼脂微生物质控结果
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