浅谈灭菌前后培养基pH值差异的原因

  培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物的试验结果，而pH值又是培养基的重要监控项目。这是因为微生物的生长不仅依赖丰富的营养，还需要一个适宜的pH环境，只有在适宜的pH环境下微生物才能正常生长繁殖或体现其生物特性，因此培养基pH值是否符合要求直接影响微生物检验结果。在培养基配制过程中，灭菌过程对培养基pH值影响尤为重要。我们常常可以发现，培养基在灭菌前后pH值有差异，一般灭菌后pH值都会有所下降，这是为什么呢？本文我们将和大家简单聊一下灭菌前后pH值变化的那些事。

一、灭菌的时间和温度

  在高压湿热灭菌时，长时间的高温会对培养基产生很多不利的影响，例如会导致营养物质分解、营养成分改变以及pH值变化，进而影响微生物生长。同时还可能引起培养基颜色变化、透明度降低、琼脂凝胶强度变化等。培养基在灭菌过程中，灭菌的温度和时间，高压灭菌器升温、降温的速率，灭菌容器的容积和装载方式等因素都对培养基的灭菌有着重要影响。

二、培养基的成分

  在培养基的配制过程中我们会发现，同样的灭菌温度和时间，同样的体积和装量的不同培养基，在灭菌后pH值变化不同，有的培养基pH值变化较多，有的培养基pH值变化较少。这是因为不同培养基的成分不尽相同，而不同的成分在灭菌过程中对培养基ph值有着不同的影响。糖类和蛋白胨是培养基中最常见的两种重要成分，那么这两种成分分别对培养基灭菌后pH值有着什么样的影响呢？

  糖类，例如葡萄糖、乳糖等作为碳源被微生物所利用。糖类在高温条件下会产生有机酸使培养基pH值下降。一般情况下，培养基含糖量越高，灭菌后pH值下降越多。如果过度灭菌pH值变化会更加明显。同时，糖类在高温灭菌时容易焦化，使培养基颜色加深。

  蛋白胨一般作为培养基氮源，为微生物的生长提供营养物质。蛋白胨在培养基灭菌时还能对培养基的pH值变化起到一定的缓冲作用。一般含胨量高的培养基，灭菌前后pH值变化相对较小。

  另外，若培养基成分中含有缓冲剂，如磷酸氢二钾等，也可以减少培养基灭菌前后pH值的变化。

三、测量pH值时的温度

  同一培养基在不同温度下测得的pH值也会有一定差异，一般培养基的pH值会随着测量时温度的升高而降低。培养基灭菌之后未完全冷却时，测量的pH值一般会偏低，这是由于温度升高时溶液中的游离离子数增多，测得的pH值较低；反之，当温度降低时游离离子数减少，测得的pH值较高。通常我们在测定培养基pH值时，温度控制在25℃左右。

  本文转载自微信公众号北京三药。

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