荚膜染色液的使用方法及结果判定

一、实验原理

 荚膜是细菌细胞壁外的一层粘液性多糖类物质，其对染料的亲和力较弱，因此不容易着色，通常采用负染色法染色，让菌体和背景着色而荚膜不着色，从而使菌体周围呈现透明圈。由于荚膜本身含水量较多，质地疏松且单薄，因此在染色的时候不能加热固定，以免荚膜受热皱缩变形。荚膜染色可用于肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、炭疽芽孢杆菌以及产气荚膜梭菌的鉴定。

二、试验方法

 1、制作适当厚度的细菌涂片，在空气中自然干燥，不需要加热固定。

 2、滴加适量的A试剂于载玻片上，需将菌体完全覆盖，染色5-7分钟。

 3、用B试剂冲洗涂片，冲洗要适度，2-3遍即可。

 4、用吸水纸吸干，并立刻滴加1-2滴香柏油到涂片上，以防止结晶的形成。

 5、由低倍镜开始调节视野，最终在油镜下观察染色结果。

三、实验结果

  背景为蓝紫色，菌体紫色，荚膜为无色或者浅紫色。如下图所示：

四、注意事项

 1、染色程度可通过改变染色时间做适当的调整。

 2、脱色时不可用水冲洗，必须用B液。

 3、不能加热干燥固定涂片，以避免荚膜皱缩。

 4、可多挑一些菌苔与水充分混合，并将粘稠的菌液尽量涂布均匀。

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