V-J琼脂培养基的原理和使用方法

林娇娇
录入时间:2021-7-23 14:43:28 来源：青岛海博生物

一、试验原理

本培养基用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。

明胶蛋白胨、酵母浸粉为微生物的生长提供氮源、碳源及维生素；甘露醇为可发酵糖类；酚红为酸碱指示剂；磷酸氢二钾为pH缓冲剂；甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用；较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长，金黄色葡萄球菌可还原亚碲酸钾，使菌落显黑色，同时可分解培养基中的甘露醇产酸，使培养基变黄；琼脂是培养基的凝固剂。

二、培养基配方（g/L）

明胶蛋白胨	10.0
酵母浸粉	5.0
甘露醇	10.0
酚红	0.025
磷酸氢二钾	5.0
氯化锂	5.0
甘氨酸	10.0
琼脂	16.0
pH7.2±0.2	25℃

三、试验方法

1、称取本品61.0g，加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中，煮沸1分钟，121℃高压灭菌15min，冷至45-50℃左右时，加入20mL过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液，混匀，倾入无菌平皿。

2、制备质控菌液，接种到培养基上。

3、放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。

四、结果观察与解释

接种以下质控菌株，放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。

质控菌株	菌株编号	接种量	回收率	生长情况	其它特征
金黄色葡萄球菌	ATCC 25923	10-100	≥70%	+++	黑色菌落，菌落周围黄色
金黄色葡萄球菌	ATCC 6538	10-100	≥70%	+++	黑色菌落，菌落周围黄色
表皮葡萄球菌	CMCC（B）26069	10-100	≥70%	+++	黑色菌落，菌落周围不变色
大肠埃希氏菌	ATCC 25922	100-1000	/	﹣	抑制

V-J琼脂培养基微生物质控结果：


金黄色葡萄球菌ATCC 25923 黑色菌落，菌落周围黄色				金黄色葡萄球菌ATCC 6538 黑色菌落，菌落周围黄色


表皮葡萄球菌CMCC（B）26069 黑色菌落，菌落周围不变色				大肠埃希氏菌ATCC 25922 抑制

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