一、试验原理
用于滤膜法中细菌总数测定。
胰蛋白胨和大豆胨提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L)
大豆胨 |
5.0 |
胰蛋白胨 |
15.0 |
固绿FCF |
0.25 |
氯化钠 |
5.0 |
琼脂 |
15.0 |
pH值7.3±0.2 |
25℃ |
三、实验方法
1.称取本品40.25g加热溶 解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟。
2.将灭菌完毕后的培养基倒入无菌空平皿中,备用。
3.将质控菌株稀释至合适梯度,用移液枪吸取100微升均匀涂布于平皿表面,并用TSA平板做参比培养基。
四、实验结果
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养48±2小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
TSA培养基 |
PR≥0.7 |
+++ |
生长良好 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
TSA培养基 |
PR≥0.7 |
+++ |
生长良好 |
枯草芽孢杆菌 |
ATCC6633 |
10-100 |
TSA培养基 |
PR≥0.7 |
+++ |
生长良好 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
10-100 |
TSA培养基 |
PR≥0.7 |
+++ |
生长良好 |
胰化大豆坚固绿琼脂实验结果:
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大肠埃希氏菌 生长良好 |
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鼠伤寒沙门氏菌 生长良好 |
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枯草芽孢杆菌 生长良好 |
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金黄色葡萄球菌 生长良好 |
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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