神奈川试验-我妻氏培养基的使用

一、试验原理

  副溶血性弧菌在普通血平板上不溶血或只产生α溶血。但在特定条件下，某些菌株在含高盐（7%）的人O型血或兔血以及D-甘露醇做为碳源的我妻氏琼脂平板上可产生β溶血，称为神奈川现象。

  神奈川试验结果与副溶血性弧菌的致病性显著相关，该试验常用来判断菌株的毒力强弱。副溶血性弧菌有845个血清型，主要通过十三种耐热的菌体抗原(即O抗原)鉴定，而七种不耐热的包膜抗原(即K抗原)可以用来辅助鉴定。其致病力可用神奈川试验来区分。神奈川试验阳性菌的感染能力强，多数毒性菌株为神奈川试验阳性(K+)，多数非毒性菌株为神奈川试验阴性(Kˉ)。引起食物中毒的副溶血性弧菌90%神奈川试验阳性，通常在12h内出现症状。K+菌株能产生一种耐热型直接溶血素，Kˉ菌株能产生一种热敏型溶血素，而有些菌株能产生这两种溶血素。

  培养基中的蛋白胨和酵母粉提供营养；磷酸氢二钾为pH缓冲剂；7%含量的氯化钠及甘露醇做为碳源，为副溶血性弧菌溶血现象提供条件；结晶紫可抑制部分耐盐性、β溶血的葡萄球菌的生长，琼脂为凝固剂。

二、培养基成分及使用方法：

1. 培养基成分

2. 使用方法

  称取本品 11.3g，加热溶解于100ml蒸馏水中。加热至100℃保持30分钟（可沸水浴30min）。冷却至50℃左右时，按5%的体积加入新鲜兔血球，充分摇匀，倾注无菌平板备用。

三、质控方法

1、按使用方法制备培养基，用接种环挑取以下质控菌株固体培养物点种于表面干燥的平板，于37℃需氧培养18-24小时。

2、副溶血性弧菌和溶藻弧菌在培养基上的生长情况如下图所示：

副溶血性弧菌菌落周围有透明的β溶血环，溶藻弧菌菌落周围无溶血环。

四、注意事项

  在制备培养基的过程中，添加兔血球时，应先将兔血球溶液预热至40-50℃左右，再加入至冷却至50℃左右的培养基中。若二者温差过大，易在培养基中产生凝块；加入兔血球后应轻轻摇匀倒平板，若摇晃幅度过大易出现大量气泡，倒出的平板不平整；平板不宜过厚，2-3mm为宜，方便观察溶血环。

相关产品： 

我妻氏培养基基础-点击查看产品详情

我妻氏血琼脂平板（9cm）-点击查看产品详情

注：本文属海博生物原创，未经允许不得转载。

上一篇：4-甲基伞形通葡糖苷酸（MUG）培养基试验原理及试验结果

下一篇：尿素酶生化管原理及实验现象