常用检验方法

   1．细菌分类
    Reiner等用热解气相色语法对分枝杆菌进行分类，发现分枝杆菌届中各茵均具有独
持的热解物指纹图型，成功地对分枝杆菌作出了准确分类。
    2．细菌的鉴定
    (1)厌氧菌的鉴定
    气相色谱能通过测定厌氧菌的代谢产物，即抨发性脂肪酸与非挥发性脂肪酸的不同
对其准确并快速地进行鉴定；如类杆菌科中的细菌产生丁酸而不产生异丁酸和异戊酸的
细菌为校杆菌属，不产生丁酸或产生丁酸的同时又产生异丁酸和异戊酸的细菌为类杆菌
属。
    (2)霍乱弧菌的鉴定
    根据霍乱弧菌热解色谱图中出现的复合体“7”的差异，可以准确地鉴定古典型(7a＜
7B)、ElTor型(7a＞7B)、中间型(7a和7B大小相近)、气单胞菌(只有7B而无7a)。
    3．传染病的快速诊断
    各种病原微生物在其生长的环境里，常可形成各自独特的化合物或代谢产物，仅需
ng或p8的水平就可在色谱固上显示出来。气相色语法可以检出体液、组织或离体培养物
中病原微生物特征性代谢活性有关的某些微小的化学变化，因此，气相色谱技术可对临
床标本进行直接检查，从而对传染病作出快速诊断。
    三、放射测量法
    放射测量法的原理是根据细菌在生长繁殖过程中，可利用培养基中加有’‘c标记的
碳水化合物或盐类底物代谢产生”cO 2，然后通过放射测量仪(Bactec 301或Bactec 225、
Bactec 460)测量“cO 2含量的增加与否，来确定标本中有无细菌的存在。这样可迅速进
行细菌计数，检测时问随接种量、繁殖率和代谢类型而变化，但仍比常规方法要快，一
般只需6h一18h。
    四、电阻抗技术
    电阻抗是交流电路中导电物质对电流所起的阻碍和抵抗作用。微生物可使培养基中
的电惰性底物，如碳水化合物、蛋白质等营养物质，代谢成为电活性产物，如乳酸盐或
氨等。当微生物的生长和代谢活性旺盛时，培养基中的电惰性分子即为许多电活性分子
所取代，从而使培养基的电导性增大，培养物的电阻抗降低。单位时间内阻抗疽的改变
与培养基中含茵量成正比。由于不同的微生物在培养基中的代谢活性有所不同，故可利
用电阻抗测量法对其进行鉴定。
    根据上述原理，由Bactomeic Inc(美)制造的细菌记数仪(Bactometer Model
8．32)，细菌(10000以上)计数准确率(与标准平皿计数比较)在g3％以上。Bactomer由
孵育器、一对插入培养基的不锈钢电权、阻抗监测系统和一个微处理机组成。据资料报
道，在筛选牛奶样品时(2l℃)用Ba口omer可在22h之内区分出含菌大于10“和小于10。
的样品，准确率达88％；在13．7h内区分出大于10000和小于10000的试样，准确率达91％。
    五.免疫学标记技术
    用荧光家标记已知抗体(或抗原)，与特异抗原(或抗体)结合后产生荧光。Munron
(1976)用自动荧光抗体系统检测食品中的沙门氏菌，每小时能检测120个玻片检样，与
常规试验比较，准确率达96％。
    荧光抗体(或抗原)十被检物，如特异结合，荧促反应显色，结果阳性。Kjyrinrki和
heimrch(1977)用荧光抗体系统检测食品中的沙门氏茵。该系统中有一个直径47mm的
薄膜滤器，在滤器上可同时检测14个样品。Saunders和Bartlett(1977)用夹心抗体固
态荧光免疫分析技术，在1h一3h内可检出3．2ug的细菌毒家，20h内检出o．4ug的细菌
毒素。
    六、噬苗体法
    何晓青等(1984)发现一种称作肠杆菌科分届诊断噬菌体。鉴定沙门氏菌等只需
6min，加上培养茵落时间只要2d。
    具体方法：挑取鉴别培养基上的可疑菌落，作陈水培养(37℃过夜)。若菌液混浊，
作1；200稀释，再用灭菌棉签在烘干的琼脂平皿上作条状涂布，依次加噬菌体O一1、C、
E、CE，E4和Em。如表7进行判断。
   
    七、当试剂分析法
    当试剂中加入细菌内毒家可出现胶凝反应。胶凝程度(凝集价)与样品中内毒家含
量成正比。阴性菌为引起食品腐败变化的主要菌相，内毒家是革兰氏阴性茵的细胞壁成
分，通过平行试验可找出内毒素与阴性菌数及茵落总数的相关性。据报道特定地区和工
艺流程的各类食品，同时用当试剂和标准平皿计数检测，出现较稳定的相关性。汪诚天
等(1983)用当试剂分析法检出食品中小于o．1ug的毒索，整个检测过程在3h内完成。
为提供食品卫生质量的可靠评价，此法不失为一快速、灵敏、简易的筛选检测方法。
 
   

 

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