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尿素酶生化管原理及实验现象

王永兴
录入时间:2021-8-23 13:55:28 来源：青岛海博生物

一、用途：

用于细菌尿素酶反应。

二、实验原理：

产尿素酶的细菌分解尿素后产氨，pH上升培养基呈碱性，酚红为酸碱指示剂，变色范围为pH6.8-8.4，颜色由黄色变为红色。因此培养基颜色由橙色变为玫红色为尿素酶试验阳性。大多数尿素酶阴性细菌会分解培养基中少量的葡萄糖产酸，使培养基变黄，也有少数尿素酶阴性的细菌不分解葡萄糖，无颜色变化。培养基出现变黄或不变色均为尿素酶阴性反应。

三、培养基配方（g/L）：

蛋白胨	1.0
葡萄糖	1.0
氯化钠	5.0
磷酸氢二钾	2.0
20%无菌脲溶液	100mL
酚红	0.012
pH 6.9±0.1 25℃

四、试验方法：

1、用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈，掰开待用。

2、将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法，制备成5 McFarland浊度（约109CFU/ml）的菌悬液。

3、吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至生化管中，36±1℃培养24-120h后，观察实验结果。

五、结果观察与解释：

接种以下质控菌株，36±1℃培养24-120h：

质控菌株	菌株编号	生长情况	其他特征
单增李斯特氏菌	ATCC19114	+++	阴性，黄色
大肠埃希氏菌	ATCC25922	+++	阴性，黄色
普通变形杆菌	ATCC13315	+++	阳性，玫红色
奇异变形杆菌	ATCC14153	+++	阳性，玫红色
鼠伤寒沙门氏菌	ATCC14028	+++	阴性，黄色

图1-1 尿素酶生化管质控结果

备注：a:单增李斯特氏菌，b:大肠埃希氏菌，c:普通变形杆菌，d:奇异变形杆菌，e:鼠伤寒沙门氏菌，f:空白对照

六、注意事项：

本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。

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注:本文属海博生物原创，未经允许不得转载。

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