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葡萄糖酸盐试验原理与方法

徐永利
录入时间:2021-8-25 13:39:26 来源:青岛海博生物

一、试验用途及原理:

  此试验常用于绿脓杆菌和双歧杆菌的生化鉴定。

  蛋白胨和酵母粉提供基本营养需求;磷酸氢二钾调节培养基的pH;葡萄糖酸钾可被某些细菌分解成还原性的葡萄糖,然后与班氏试剂发生反应生成砖红色沉淀。


二、培养基配方(g/L)

蛋白胨

1.5

酵母粉

1.0

磷酸氢二钾

1.0

葡萄糖酸钾

40.0

pH值7.0±0.2  25℃

  班氏试剂配方(g/L)

柠檬酸钠

173.0

碳酸钠

100.0

五水硫酸铜

17.3


  1.挑取待测菌的单菌落至无菌生理盐水中,制备约109CFU/mL浓度菌悬液。

  2.吸取100微升菌悬液加入到葡萄糖酸盐生化管中,并放置于36±1℃,需氧条件下培养24±2小时(若培养双歧杆菌,需厌氧培养)。

  3.培养结束后按1:1的比例加入班氏试剂,并将生化管置于沸水浴中水浴1-10分钟,冷却后观察结果。如出现砖红色沉淀,则为阳性;若颜色依为浅蓝色,则为阴性。


三、实验结果:

质控菌株

菌株编号

接种量

(CFU)

参比或计

数培养基

方法

生长

情况

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC25922

>5000

/

定性

+++

(+)砖红色(滴加班氏试剂)

铜绿假单胞菌

ATCC27853

>5000

/

定性

+++

(+)砖红色(滴加班氏试剂)

铜绿假单胞菌

ATCC9027

>5000

/

定性

+++

(-)浅蓝色(滴加班氏试剂)


a:大肠埃希氏菌ATCC25922;b:铜绿假单胞菌ATCC27853;c:铜绿假单胞菌ATCC9027;d:空白对照

图1 葡萄糖酸盐试验


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。


 

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