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一、试验原理：
本产品用于沙门氏菌的分离培养。
酵母浸粉、蛋白胨和牛心浸粉提供微生物生长所需的碳源和氮源；氯化钠用于维持均衡的渗透压，甘露醇作为可发酵的糖类被沙门氏菌利用产酸；沙门氏菌产生的脱羧酶与L-赖氨酸盐酸盐反应生成碱性物质；在碱性条件下，硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵与沙门氏菌产生的硫化氢反应使得菌落的颜色呈现黑色；煌绿和结晶紫可抑制大肠杆菌等革兰氏阳性菌的生长；琼脂起凝固的作用。
二、培养基配方（g/L）：
表1 MLCB寒天培地培养基配方
|
成分 |
添加量 |
|
酵母浸粉 |
5.0 |
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
牛心浸粉 |
2.0 |
|
氯化钠 |
4.0 |
|
甘露醇 |
3.0 |
|
L-赖氨酸盐酸盐 |
5.0 |
|
硫代硫酸钠 |
4.0 |
|
柠檬酸铁铵 |
1.0 |
|
煌绿 |
0.0125 |
|
结晶紫 |
0.01 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
pH值6.8±0.2 |
25℃ |
三、试验方法：
1.称取本品49.0g，加热煮沸溶解于1000mL蒸馏水（可根据培养需要扩大或缩小产品用量）中，冷至50-55℃时,倾入无菌平皿，备用；
2.质控菌液按国标、SN标准、FDA标准或其它方法制备而成；
3.用接种环取一环相应菌液划线接种于无菌培养基上，36±1℃需氧培养18-24h。
四、试验结果判断：
1.外观
此干燥培养基粉末均匀，呈淡黄色，煮沸灭菌后制备好的培养基为蓝紫色透明固态。
2.生物学实验
接种以下质控菌株，放入培养箱中，于36±1℃需氧培养18-24 h，观察试验结果。
表2 MLCB寒天培地培养基不同菌株质量控制结果
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
质控情况 |
菌落特征 |
|
肠炎沙门氏菌 |
CMCC(B) 50746 |
/ |
＋＋＋ |
黑色中心菌落 |
|
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
/ |
＋＋＋ |
黑色中心菌落 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
- |
抑制 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
/ |
- |
抑制 |
图1 MLCB寒天培地培养基微生物质控结果
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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