【原理】
荧光素染色和普通染料染色法主要不同点就是荧光素染色法敏感性高,抗酸分支杆菌能与荧光染料金胺“O”结合,而金胺“O”是一种能产生强荧光的荧光色素,并具有选择性,结核菌是带有阴电荷的微生物,而荧光色素金胺“O”是一种含有自由氨基的金黄色碱性染料,它的离子带有阳电荷,因此金胺“O”能和带阴电荷的抗酸杆菌结合而着色,在荧光显微镜中的高压汞灯的紫蓝光照射激发下,使带金胺“O”染色的结核菌发出很强的桔黄色荧光,检查时用高倍镜即可查见明亮细菌。
【成分及制法】
1. 金胺“O”基础液:取金胺“O”1.0g溶于95%乙醇100ml中,置褐色瓶中可长期保存。
2. 金胺“O”应用液:取上述基础液10ml加5%石炭酸液90ml,倾入褐色瓶中可保存两周。
3. 3%盐酸酒精脱色剂:取75%酒精97ml加入3ml浓盐酸。
4. 酸性复红溶液:取酸性复红1.0g加冰醋酸1ml再加蒸馏水500ml。
【用途】
用于结核标本的快速检验和其它抗酸菌的鉴定。
【用途】
将固定好的涂片加金胺“O”应用液染5分钟,水洗后加盐酸酒精脱色20秒钟,水洗后加酸性复红复染30秒钟,然后水洗,自然干后镜检。
【注意事项】
用高倍荧光镜观察(10×40)要求24小时内镜检完毕,延长时间,荧光亮度下降,影响检出阳性结果,结核杆菌发黄绿色荧光,亮度清晰,边缘清楚轮廓正整,菌体典型,细长微弯色条均匀。其它物质及细菌绝大多数不着荧光,但也有少数着荧光物质呈逗点状荧光,亮度明暗不均,不规则,边缘不正齐,易与抗酸菌区别。
(吉林省结核病医院检验科 李桂中供稿)
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