结核菌鉴别染色液

【原理】

   一般认为结核菌体内含有脂类和分支菌酸,具有嗜酸性和嗜醇性,所以用甲醇使致病性抗酸菌不脱色或轻微脱色,非致病性抗酸菌完全脱色。

【成分及制法】

  (1)5%甲醇;

  (2)碱性复红石炭酸应用液:取碱性复红酒精饱和液10ml加5%石炭酸90ml混合即可;

  (3)3%盐酸酒精:取95%酒精97ml加浓盐酸3ml,混合;

  (4)碱性美蓝液:美蓝饱合液30ml加10%氢氧化钾溶液0.1ml 再加蒸馏水100ml,用时将此液稀释10~20倍。

【用途】

  鉴别致病和非致病抗酸性杆菌。

【染色步骤】

  将固定好的标本片,浸入50%甲醇溶液中,置于37℃温箱中2小时,取出涂片,用5%石炭酸复红加温染色5分钟,水洗后用盐酸酒精脱色1分钟左右,至涂片无色或稍呈粉红色为止,水洗后滴加碱性美蓝液复染30秒至1分钟,水洗,干后用油浸镜下观察。致病性抗酸菌60分仍不脱色或轻微脱色,镜检为红色或微粉红色。非致病菌抗酸菌在10分钟以内即完全脱色。镜检为无色。

  * 饱和美蓝配制法:取美蓝2~3g,加95%酒精100ml。

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