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甘露醇卵黄培养基基础原理和使用方法

丁鑫鑫
录入时间:2021-10-20 10:36:43 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

  用于分离培养病原性金黄色葡萄球菌。

  蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;D—甘露醇为可发酵糖类;7.5%浓度氯化钠可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生长;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂,金黄色葡萄球菌可分解培养基中的甘露醇产酸,使菌落周围变黄,并能降解卵黄中的卵磷脂使菌落产生晕圈。


二、培养基配方(g/L):

蛋白胨

10.0

D-甘露醇

10.0

牛肉粉

2.5

氯化钠

75.0

酚红

0.025

琼脂

15.0

pH 7.4±0.2 25℃


三、试验方法:

  粉体装培养基的使用:

  1. 称取本品112.5g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸1分钟,121℃高压灭菌15分钟,待培养基冷却至45-50℃时,无菌操作,加入50%卵黄乳液30ml,摇匀,倾入无菌平皿,备用。

  2. 制备质控菌液。

  3. 选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

  4. 36±1℃需氧培养24-48小时,记录实验结果。


四、结果观察与解释

  接种以下质控菌株,36±1℃需氧培养24-48小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控评定标准

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC25922

/

/

半定量

G≤1

/

伤寒沙门氏菌

ATCC14028

/

/

G≤1

/

金黄色葡萄球菌

ATCC6538

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

黄色菌落,菌落周围有晕圈

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

20-200

PR≥0.7

黄色菌落,菌落周围有晕圈

表皮葡萄球菌

CMCC(B)26069

20-200

PR≥0.7

红色菌落,没有晕圈




图1-1 甘露醇卵黄培养基微生物质控结果


五、注意事项:

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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