一、试验原理：
用于分离培养病原性金黄色葡萄球菌。
蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；D—甘露醇为可发酵糖类；7.5%浓度氯化钠可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生长；琼脂是培养基的凝固剂；酚红为pH指示剂，金黄色葡萄球菌可分解培养基中的甘露醇产酸，使菌落周围变黄，并能降解卵黄中的卵磷脂使菌落产生晕圈。
二、培养基配方（g/L）：
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蛋白胨 |
10.0 |
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D-甘露醇 |
10.0 |
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牛肉粉 |
2.5 |
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氯化钠 |
75.0 |
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酚红 |
0.025 |
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琼脂 |
15.0 |
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pH 7.4±0.2 25℃ |
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三、试验方法：
粉体装培养基的使用：
1. 称取本品112.5g，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中，煮沸1分钟，121℃高压灭菌15分钟，待培养基冷却至45-50℃时，无菌操作，加入50%卵黄乳液30ml，摇匀，倾入无菌平皿，备用。
2. 制备质控菌液。
3. 选择合适稀释度的质控菌液0.1ml，均匀涂布于平板上，每一稀释度接种两个平板。用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环，将接种环接触容器边缘3次去除多余液体，在平板表面划六条平行直线，同时接种两个平板。
4. 36±1℃需氧培养24-48小时，记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株，36±1℃需氧培养24-48小时：
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
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伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
G≤1 |
/ |
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金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
黄色菌落，菌落周围有晕圈 |
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金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
20-200 |
PR≥0.7 |
黄色菌落，菌落周围有晕圈 |
||
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表皮葡萄球菌 |
CMCC(B)26069 |
20-200 |
PR≥0.7 |
红色菌落，没有晕圈 |
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五、注意事项：
本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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