生、死结核菌鉴别染色液

录入时间:2021-10-21 10:44:59 来源：现代微生物培养基和试剂手册

【原理】

一般认为与结核菌体内的脱氧核糖核酸与可染性有关。如果将抗酸菌经脱氧核酸消化或盐酸水解,使其丧失对孔雀绿或亚甲兰的可染性即可染上复红。分支杆菌对孔雀绿或亚甲兰的可染性,所以似乎要决定于菌体内脱氧核糖核酸的聚合程度,而一部分染成绿色的细菌,其脱氧核糖核酸在一定程度上失去聚合化,即为死菌。

【成分及制法】

(1)1%雀绿水溶液(pH4.1);

(2)1:5石炭酸复红液(5%石炭酸复红液1份加水5份);

(3)8%硝酸水溶液;

(4)0.1%~0.5%俾斯麦褐水溶液。

【用途】

用于抗酸菌标本活菌计数。

【染色步骤】

取已固定的涂片,滴加温度在60~65℃的1%孔雀绿染色液数滴,染色5~10分钟,水洗后滴加1:5石炭酸复红液染色3~5分钟,水洗后滴加8%硝酸,脱色30秒,水洗后滴加0.3%俾斯麦褐染色30秒钟,然后水洗,干后镜检。活菌着绿色,死菌着红色。