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ITC肉汤培养基原理和使用方法

张辉
录入时间:2021-10-29 13:39:08 来源:青岛海博生物

一、小肠结肠炎耶尔森氏菌情况简要介绍

  小肠结肠炎耶尔森氏菌食物中毒是近年来国际上引起重视的一种肠道传染病。该菌隶属于肠杆菌科耶尔森氏菌属,该属包括鼠疫耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌和小肠结肠炎耶尔森氏菌3种。此菌最适生长温度为22℃~29℃,在食物中容易大量生长繁殖,食物和水受到此菌污染,可引起人的胃肠炎暴发,其症状表现与沙门氏菌食物中毒相似。本菌在0℃~4℃可以发育,是冰箱保藏食物潜在的危险病原菌,因此,在食品卫生工作中,对于这种可以通过食物传播而具有嗜冷性的致病菌必须引起足够的重视。


二、培养基检验原理

  ITC肉汤又称为氯苯酚替卡西林氯酸盐肉汤、三氯生替卡西林氯酸盐肉汤、三氯苯氧氯酚替卡西林氯酸盐肉汤。本产品用于耶尔森氏菌的选择性培养增菌。

  胰蛋白陈和酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持培养基均衡的渗透压;硫酸镁提供必需的离子;孔雀石绿具有杀菌作用;替卡西林具有杀菌剂效应,尤其对革兰氏阴性菌有作用,但也对革兰氏阳性菌有作用;三氯生能够有效抑制革兰氏阳性菌,氯酸钾具有消毒性能。


三、培养基配方(g/L):

胰蛋白胨
10.0
酵母浸粉
1.0
硫酸镁(6H2O)
60.0
氯化钠
5.0
孔雀石绿
0.01
pH值6.9±0.2(25℃)


四、试验方法:

  1. 配制培养基:称取本品44.0 g,加热搅拌溶解于1000 mL蒸馏水中,分装每瓶100 mL,121℃高压灭菌15分钟,冷至45±5℃时,每100 mL培养基中无菌操作加入1支ITC添加剂,混匀,备用。

  2. 10倍梯度稀释法制备质控菌液;

  3. 选择合适稀释度的质控菌液100 μL,接种到试管中,每一稀释度接种两个平行管;同时吸取稀释液100 μL,接种到试管中作为空白对照。

  4. 放置25℃需氧培养48小时,记录试验结果。


五、试验结果判断:

  接种以下质控菌株,放置25℃需氧培养48小时。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况

其他特征

小肠结肠炎耶尔森菌

CMCC(B) 52204

10-100

+++

浑浊

金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

100-1000

-

抑制

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

100-1000

-

抑制



图1 质控菌株在ITC肉汤上的生长情况


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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