《中国药典》对硫乙醇酸盐流体培养基的相关规定

一、培养基简介：

  硫乙醇酸盐流体培养基，也称液体硫乙醇酸盐培养基（FT），是在有氧条件下培养厌氧菌的一种澄清液体培养基。

  《中国药典》中列出该培养基的配方为：

  培养基配方中各成分的作用及原理，可参考

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  本文主要就《中国药典》中对该培养基的质量和使用方法上的一些规定进行分析和解读。

二、关于使用范围的规定：

  《中国药典》规定：硫乙醇酸盐流体培养基主要用于厌氧菌的培养，也可用于需氧菌的培养；胰酪大豆胨液体培养基用于真菌和需氧菌的培养。

  顾名思义，对于厌氧菌的培养，必须使用硫乙醇酸盐流体培养基，而对于需氧菌，则有两种培养基可选用，硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基，本人认为，对于需氧菌应首选胰酪大豆胨液体培养基，因为硫乙醇酸盐培养基因为空间有限，里面的氧浓度未必能满足所有需氧菌的生长。尤其是药品中有些需氧菌可能菌体细胞已经受损，在这种氧气浓度受限的培养基中未必能准确检出；另外，培养基中刃天青的存在，也会对细菌的生长有抑制。综合这两方面考虑，为了将药品中的需氧菌尽可能检出来，建议最好使用胰酪大豆胨液体培养基。

三、关于氧化层的规定：

  《中国药典》规定：该培养基的装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的1/2。

  即分装硫乙醇酸盐培养基所用的容器必须有一定的高度，最终目的是为了能够更好地营造培养基内部的厌氧环境。目前我公司产品有多种规格，干粉形态、即用型瓶装和即用型试管装。其中瓶装又分别有100mL、200mL和500mL规格，管装有10mL和7.5mL规格，满足不同客户群的需求（如图1）。

图1 公司现有的硫乙醇酸盐流体培养基产品

  对于氧化层的高度，2020版《中国药典》还有如下规定：在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/3（2015版药典中该项规定为1/5），否则，须经100℃水浴加热至粉红色消失（不超过20分钟），迅速冷却，只限加热一次，并防止被污染。

  正常生产出的硫乙醇酸盐是有氧化层的，这是有该款培养基的配方特性所决定，并不妨碍试验人员使用，只要氧化层满足相关规定，就能有效地检出样品中的厌氧菌。

  生孢梭菌和产气荚膜梭菌在本公司产品中的生长形态如图2所示。

图2 液体硫乙醇培养基中厌氧菌的生长状态

四、有关培养基存放和培养温度的规定：

  制备好的培养基若不即时使用，应置于无菌密闭容器中，在2-5℃避光的环境下保存，并在经验证的保存期内使用。

  除另有规定外，接菌后的硫乙醇酸盐流体培养基置30-35℃培养。

五、有关对菌种的要求：

  对于培养基灵敏度的检查，《中国药典》规定菌种培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代(从菌种保存中心获得的干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存和确认，以保证试验菌株的生物学特性。

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