【原理】
本培养基中含有胰蛋白䏡(Tryptose)、蔗糖(Sac-charose)、石蕊(Litmus)、中性红(Neutral red)等成分,因此简称为TSLN培养基。培养基中的孔雀绿为抑制剂,可抑制大肠杆菌、痢疾杆菌和伤寒杆菌等杂菌的生长。石蕊和中性红为复合指示剂,可因细菌分解蔗糖产生不同程度的酸或因分解蛋白质而产碱,从而使菌落显示出不同的颜色。石蕊为酸碱指示剂及氧化还原指示剂,pH范围5.6~8.3,在酸性时显粉红色,中性时淡紫色,碱性时呈蓝色,还原时褪色。中性红pH范围6.8~8.0,在酸性时为红色,碱性时呈黄色。此种复合指示剂显示菌落颜色的敏感性比单一指示剂好,本配方使用量对多杀巴氏杆菌无毒性。硫代硫酸钠能使红色菌落鲜明。吐温80能抑制许多细菌扩张生长。多杀巴氏杆菌在此培养基上因缓慢分解蔗糖,于37℃下培养24~48小时,开始为显微红色较小露水珠样菌落,随着培养时间的延长,由微红到玫瑰红色,在透射光下用扩大镜观察菌落边缘显红色或蓝绿色荧光。
【成分】
每升蒸馏水中的成分:
胰蛋白䏡(Oxoid)
10g
胰蛋白胨(Oxoid)
5g
酵母浸膏
2g
氯化钠
5g
蔗糖
10g
硫代硫酸钠
0.5g
CT吐温80贮存液
12~25ml
琼脂粉(日本进ロ分装)
15g
1%孔雀绿水溶液
1.5ml
2.5%石蕊水溶液
5ml
1%中性红水溶液
10ml
【制法】
悬浮上述各成分(除孔雀绿,石蕊和中性红外)于1000ml蒸馏水内,加温使完全溶解后,调整至pH7.2~7.4再加入孔雀绿、石蕊及中性红混匀。121℃灭菌15分钟,冷却至50℃左右,倾注平皿,制成的培养基,底色为黄棕色。
【用途】
用于分离多杀巴氏杆菌(Pasteurella multocida)
【注意事项】
1.本培养基中如缺少胰蛋白䏡和胰蛋白胨成分,亦可用503型蛋白胨代替,但需在培养基中添加5%的血清方可使多杀巴氏杆菌生长良好。
2.由于市售吐温含有未酯化的腊肪酸,聚乙二醇和其它副产品,有阻止细菌生长的作用,因此本培养基中使用经活性炭处理(CT)的吐温80。
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