一、试验原理:
用于细菌靛基质试验。
蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;含有色氨酸酶的细菌,能分解蛋白胨中的色氨酸,形成靛基质(吲哚)。靛基质无色,当加入对氨基苯甲酸试剂后,形成可见的红紫色醌式化合物,即玫瑰靛基质。
二、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
10.0 |
||
氯化钠 |
5.0 |
||
pH7.4 |
25℃ |
三、试验方法:
1. 将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制成5 McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液。
2. 吸取0.05-0.08ml(约1-2滴)至生化管内,36±1℃培养18-24h后,滴加Kovacs靛基质试剂2-3滴,观察试验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,36±1℃培养18-24h:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
大肠埃希氏O157菌 |
ATCC35150 |
+++ |
阳性,有红色环 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
+++ |
阳性,有红色环 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
+++ |
阴性,有黄色环 |
产气肠杆菌 |
ATCC13048 |
+++ |
阴性,有黄色环 |
图1-1 蛋白胨水生化管质控结果
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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