军团菌用α-YE培养基

【原理】

  军团菌(Legionella)的分离培养需满足它对多种营养物质的需要以及严格的pH条件。对军团菌的生理研究表明，为保证该菌的正常生长和繁殖需要有20种氨基酸，半胱氨酸是重要氨基酸之一。B族维生素及铁是不可缺的成分，α酮戊二酸有刺激生长的作用。

  本改进培养基的基础营养为酵母提取物及半胱氨酸，以复合维生素B及右旋糖酐铁满足对生长因子及铁元素的需要，添加α酮戊二酸为生长刺激剂。用过滤法除菌防止产生毒性物质，并有效保持pH值的准确，因而该菌在此培养基中生长繁殖快。

【成分】

甲液：

  (1)甲液全部成分按量溶于水中，用KOH溶液调整至pH6.9±0.05, pH测定应使用灵敏度不低于0.05的器材因军团菌对Na⁺敏感，配制时最好用去离子水；

  (2)配制后先用滤纸去一般不溶物，再用G6滤器除菌(如过滤困难亦可先经G5过滤）。除菌滤液按需定量分装，冰箱保存备用；

  (3)乙液用去离子水(pH应接近中性)配制，琼脂含量可视情选定，121℃灭菌15分钟备用。乙液的分装量应与甲液对等、但容器需有2倍容积；

  (4）使用时将乙液融化，同时将甲液保温到55~60℃，待乙液降温到55℃左右时，与甲液等量混合倾注平皿，制成平板分离培养基。

【用途】

  主要用于军团菌的增殖和分离培养。

【注意事项】

  α-YE使用效果良好，材料易得，无需加缓冲剂可保pH准确。因不含活性碳便于观察产生褐色素反应及作氧化酶试验。甲液成分半量配制可作液冻培基用于增菌培养。α-YE加入抗生素亦可制成选择性培基。

（天津医学院微生物学教研室 陈恩临供稿 全章由第二军医大学 谢正旸审编）

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