一、试验原理：
大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(第二代)是青岛海博生物公司再次改良的培养基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌和大肠菌群的快速检测。大肠杆菌和大肠菌群分别具有特异性的酶，利用其分解底物得到产物的不同来区分大肠杆菌和大肠菌群。大肠杆菌显蓝色至紫色，大肠菌群显红色，革兰氏阳性菌被抑制。
二、培养基配方（g/L）：
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特殊营养物质 |
33.0 |
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显色剂 |
0.3 |
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琼脂 |
13.0 |
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pH 6.8-7.2 25℃ |
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三、试验方法：
1.称取本品46.3g加入1000ml蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸不要超过1分钟。取1ml制备好的样品液加入直径为9cm无菌平皿中心，倾入冷却至45-50℃ 培养基约15ml，混匀，凝固后，再加入一层培养基进行履盖。 或冷却至45-50℃时,倾入无菌平皿,琼脂完全凝固后,在37℃的培养箱中倒置放置1-2小时,加入适当稀释度的样品液1ml,涂布于培养基上,36℃培养18～24h。
2.选用有30～200个菌落的平板，计数平板上出现的典型大肠菌群和大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色，大肠菌群为粉红色菌落，其它细菌为无色或黄色菌落;
总大肠菌群=蓝色菌落+紫色菌落+粉红色菌落
大肠杆菌=蓝色菌落+紫色菌落。
3.对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上，36℃培养12-16小时，挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装4种x4套)。
四、结果观察与解释
在36℃培养18～24h小时：
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质控菌株 |
ATCC |
生长情况 |
菌落颜色 |
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金黄色葡萄球菌 |
25923 |
-/+ |
无色 |
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大肠杆菌 |
25922 |
+++ |
蓝色 |
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沙门氏菌 |
14028 |
+++ |
无色 |
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阴沟肠杆菌 |
23355 |
+++ |
粉红色 |
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产气肠杆菌 |
35029 |
+++ |
粉红色 |
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弗氏柠檬酸盐杆菌 |
43864 |
+++ |
粉红色 |
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肺炎克雷伯氏菌 |
10031 |
+++ |
粉红色 |
图1典型特征：大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色，大肠菌群为粉红色菌落，其它细菌为无色菌落。
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