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改进的细菌L型培养基



录入时间:2022-4-7 15:37:35 来源:现代微生物培养基和试剂手册

【原理】

  由于L型细菌细胞壁的缺损,常呈多型性,可因水内渗引起细胞膨胀破裂而死亡,为此L型菌必须在高渗透压培养基内才能存活,因而在培养基配制时,渗透压稳定剂起重要作用。以前选用的渗透压稳定剂多是蔗糖或NaCI。本培养基选用NH4Cl作为渗透压稳定剂,并制成软琼脂,使细菌深入培养基内生长,因此菌落出现早,存活时间长(20天以上)。


【成分】

水解乳蛋白
10g
䏡胨
10g
磷酸氢二钠
0.2g
氯化铵
3.4g
葡萄糖
0.2g
琼脂
0.8~1g
牛肉浸液
100ml
灭活人血浆或马血清
10~20ml

【制法】

  (1)先将肉浸液调至pH8.0,115℃灭菌10分钟后,用滤纸过滤除去沉淀物;

  (2)血浆除外,其它成分按量加于过滤后的肉浸液中,溶化后,调至pH7.4~7.6;

  (3)定量分装,115℃灭菌10分钟后,备用;

  (4)使用前,将溶化琼脂冷至56℃,加入血浆或马血清,混匀后,倒入无菌平皿内,凝固后,待用。


【用途】

  主要用于L型细菌的培养和分离。如在本培养基内加1.25%的甘氨酸可诱导出乙型链球菌L型。

  分离临床标本中L型细菌时,可将抗菌素加入培养基内接种培养,一般接种后培养20~24小时,出现肉眼可见菌落。诱导L型可用纸片法(制作方法同药敏纸片),将诱导剂加入培养内亦可作传代用。


【注意事项】

  诱导剂可根据细菌的种类选择不同的诱导剂,例如诱导金葡菌L型,用青霉素钾盐,每纸片含量20u,200u,每个平皿各贴一个纸片,放湿盒内,37℃培养,每天观察。在抑菌圈内有很小的菌落出现时,在显微镜下观察(放大40~100倍),菌落呈油煎蛋样,即为L型菌落,标明位置,同琼脂一起挖出,于含青霉素传代培养基内传代。

(山东医科大学微生物学教研组 修玉珍供稿)

 

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