改进的细菌L型培养基

【原理】

  由于L型细菌细胞壁的缺损，常呈多型性，可因水内渗引起细胞膨胀破裂而死亡，为此L型菌必须在高渗透压培养基内才能存活，因而在培养基配制时，渗透压稳定剂起重要作用。以前选用的渗透压稳定剂多是蔗糖或NaCI。本培养基选用NH₄Cl作为渗透压稳定剂，并制成软琼脂，使细菌深入培养基内生长，因此菌落出现早，存活时间长（20天以上）。

【成分】

  (1）先将肉浸液调至pH8.0,115℃灭菌10分钟后，用滤纸过滤除去沉淀物；

  (2）血浆除外，其它成分按量加于过滤后的肉浸液中，溶化后，调至pH7.4~7.6;

  (3）定量分装，115℃灭菌10分钟后，备用；

  (4）使用前，将溶化琼脂冷至56℃，加入血浆或马血清，混匀后，倒入无菌平皿内，凝固后，待用。

【用途】

  主要用于L型细菌的培养和分离。如在本培养基内加1.25％的甘氨酸可诱导出乙型链球菌L型。

  分离临床标本中L型细菌时，可将抗菌素加入培养基内接种培养，一般接种后培养20~24小时，出现肉眼可见菌落。诱导L型可用纸片法（制作方法同药敏纸片），将诱导剂加入培养内亦可作传代用。

【注意事项】

  诱导剂可根据细菌的种类选择不同的诱导剂，例如诱导金葡菌L型，用青霉素钾盐，每纸片含量20u,200u，每个平皿各贴一个纸片，放湿盒内，37℃培养，每天观察。在抑菌圈内有很小的菌落出现时，在显微镜下观察（放大40~100倍），菌落呈油煎蛋样，即为L型菌落，标明位置，同琼脂一起挖出，于含青霉素传代培养基内传代。

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