【原理】
细菌L型属细菌缺壁型,在低渗液体内,水分可通过半透性的细胞膜内渗,常可引起菌体的肿胀而破裂。用高渗而营养丰富的培养基有利于细菌L型的生长。
地龙含有多种氨基酸、碳水化合物、脂类和维生素等,营养极为丰富。黄芪含有蔗糖、数种氨基酸、胆碱,叶酸等。当归含有大量(40%)的蔗糖、维生素B12和A等物质。因此由地龙、黄芪和当归等制成的基础液,制成L880培养基,适用于细菌L型的生长。
【成分及制法】
1. L880基础液:
先将地龙用自来水浸泡30分钟,清洗去除泥沙,剪碎后,置2000ml三角烧瓶内,再加入黄芪、当归及蒸馏水1000ml,煮沸30分钟,加氯化钠5g,冷却后,调整至pH1.5~2.0,加胃蛋白酶0.35g,混匀,37℃温度消化作用3~4小时。取其上清液或滤液,再补加蒸馏水1000ml。调整至pH8~8.2。121℃灭菌20分钟,冷藏备。
地龙(干制)
70g
当归
2g
黄芪
7g
氯化钠
5g
蒸馏水
1000ml
L880增菌管:
蛋白胨(日本)
20g
蔗糖
150g
氯化钠
50g
L880基础液
1000ml
将上述成分置于烧杯内加热溶解,调至pH7.4~7.6,分装,121℃灭菌20分钟后,置冰箱内备用。
L880琼脂培养基:
蛋白胨(日本)
20g
氯化钠
40g
琼脂
8g
L880基础液
1000ml
将上述成分置于2000ml三角烧瓶内,加热溶解,调整至pH7.4~7.6,121℃灭菌20分钟后,冷至50~60℃,迅速倾注平皿,置冰箱内备用。
【用途】
用于细菌L型的培养、分离和鉴定。
【注意事项】
1.地龙有广地龙(产于两广和沿海一带)和土地龙(产于内地)等。广地龙和土地龙,新鲜地龙和干制地龙,均可用于本培养基,以中药房取之的干制广地龙为宜。
2.L880培养基中仅含中药地龙,则菌落生长缓慢,细小,且不能形成L型菌落。含有地龙、黄芪和当归3种成分,则细菌型和L型菌落生长迅速、良好。三者缺一不可。
(开封市公费医疗医院 袁淑聪、徐永林、李中洋、郭欣供稿)
上一篇:需氧菌和L型菌的改良增菌液
下一篇:改进的幽门弯曲菌培养基