最低抑菌浓度（MIC）测定-MH肉汤稀释法

一、原理

  用MH肉汤将抗菌药物进行一系列稀释后，定量接种待检菌，培养后进行观察，抑制待检菌肉眼可见生长的最低药物浓度，即为该药物对待检菌的最低抑菌浓度（MIC）。该结果对于临床上的细菌感染治疗或动物感染治疗具有重要的指导意义。

二、操作方法

  1.澄清MH肉汤培养基干粉21g，加热溶解于1000mL纯化水中，分装至小试管，第一管分装4mL，后面每管分装2mL，121℃灭菌15min。也可先将培养基灭菌，后分装于无菌试管。

  2.将试管进行编号，在第一支管中加入相应的抗菌药物，使抗菌药物浓度为128mg/L，混合均匀，吸取2mL加入至第二支试管中混合均匀，再吸取2mL加入至第三支试管中混合均匀，依次操作至第十三支试管，将第十三支试管吸取2mL舍去，此时第1-13管的药物浓度依次为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125mg/L（也可根据实际情况改变药物浓度或增加稀释度），第14和15支试管不含抗菌药物。

  3.将活化好的待测菌株用生理盐水制成含菌量为10⁷CFU/mL的菌悬液，向第1-14支试管中分别加入0.1mL菌悬液，置35-37℃培养18-24h（或其他适宜的生长条件），观察生长情况。

三、生长现象

  以野生分离到的一株大肠杆菌为例，测试多粘菌素B对该菌的最低抑菌浓度，结果如下图，第1-9支试管澄清，第10支试管开始有明显浑浊生长，说明多粘菌素B对该大肠杆菌的最低抑菌浓度为0.5mg/L。

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