一、试验原理:
用于弯曲杆菌甘氨酸耐受性试验。
蛋白胨和胰酪蛋白胨提供氮源;酵母浸粉提供各种维生素;葡萄糖提供能量;氯化钠维持均衡的渗透压;亚硫酸氢钠为还原剂;琼脂为培养基的凝固剂。空肠弯曲菌对甘氨酸有耐受性,穿刺接种于甘氨酸培养基中,置于微需氧环境下,在42℃培养48小时,在培养基表面出现云雾状现象。
二、培养基配方(g/L):
布氏肉汤 |
28.85 |
琼脂 |
1.6 |
甘氨酸 |
10.0 |
pH值7.0±0.2(25℃) |
三、试验方法:
1. 称取本品4.0克,加热溶解于100mL蒸馏水中,分装13mm×100mm试管,每支约4mL,121℃高压灭菌15分钟,备用。
2. 将质控菌株穿刺接种于甘氨酸培养基中。
3.弯曲杆菌42℃微需氧培养18-24小时;
4.产气荚膜梭菌42℃厌氧培养18-24小时;
5.大肠埃希氏菌42℃需氧培养18-24小时,观察试验结果(如结果不明显,可延长培养时间)。
四、试验结果判断:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
弯曲杆菌 |
ATCC 29482 |
+++ |
培养基表面有云雾状生长 |
产气荚膜梭菌B型 |
/ |
+++ |
/ |
产气荚膜梭菌D型 |
/ |
+++ |
/ |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
+++ |
/ |
图1 甘氨酸培养基微生物质控结果
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