厌氧菌双管培养基

【原理】

   本培养基是以Lombard-Dowell (LD）培养基为基础加入厌氧菌选择性的抗生素配制而成。LD培养基的特点是不用硫乙醇酸钠而用亚硫酸钠及半胱氨酸作还原剂，不加葡萄糖以消除对某些厌氧菌的致死效应；此外，蛋白胨含量少可减少氨基酸产生的碱性产物；因此，适宜于绝大多数厌氧菌生长，一管中加入的庆大霉素不受高压灭菌影响，在培养基中比较稳定，可抑制绝大多数需氧与兼性厌氧菌；少量的青霉素可抑制芽孢梭菌生长。第1管培养基在于分离培养临床标本中最常见的拟杆菌。另一管中含新霉素，在于分离各种厌氧菌，但要注意对某些菌无抑制力。

【成分】

【制法】

  先将蒸馏水中的基础成分加热溶解，再加入溶于5ml的1mol/L NaOH 的0.4g, L半胱氨酸盐酸盐、1.0ml1%氯化血红蛋白溶液（1g溶于1mol/L NaOH20ml，加蒸馏水至100ml）等，加热溶解，调至pH7.5,121℃灭菌15分钟，分成两份，分别加入抗生素，分装成7ml／管。拔去棉塞，盖上青霉系小瓶上灭菌的胶帽，趁热套上小号赛珞罗胶帽待干燥包封，贮冰箱内保存备用。

【用途】

  用作分离培养厌氧细菌。培养基使用前置沸水浴内10分钟去氧（当天制作则不必），冷至室温。用75％乙醇消毒管帽，标本用带7号长针的结核菌素射器每管注入0.2ml左右。垂直置35℃温箱培养，每天肉眼检查1次，至第4天不见生长菌落报告阴性结果。如见生长，涂片染色镜检，再做耐氧试验等。

【注意事项】

  一般情况下，第1管中生长的革兰氏阴性多形性杆菌可报告为拟杆菌，第2管中除了能生长拟杆菌外，其它厌氧菌也能生长。见到厌氧生长的菌落，要综合菌形、产气、动力、触酶试验以及在两管培养基中对抗生素的敏感性等进行分析判定结果。此种培养基培养法不需要特殊的厌氧培养设备，具有简便快速节省等优点，适合于一般实验室使用。

（大连解放军210医院 林听宝供稿）

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