一、试验原理:
用于真菌的分离检测。
脑心浸粉、胰酪蛋白胨和蛋白胨提供氮源,维生素和矿物质;葡萄糖提供碳源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠是缓冲剂;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L):
脑心浸粉 |
10.0 |
胰酪蛋白胨 |
2.5 |
蛋白胨 |
7.0 |
葡萄糖 |
21.0 |
氯化钠 |
2.5 |
磷酸氢二钠 |
1.25 |
琼脂 |
15.0 |
pH 7.0±0.2 25℃ |
三、试验方法:
1. 称取本品59.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用
2. 制备好的平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,室温保存。
3. 使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。
4. 制备质控菌液
5. 选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。
6. 23-28℃倒置培养基培养48-72小时,记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,23-28℃倒置培养基培养48-72小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计 数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
白色念珠菌 |
CMCC(F)98001 |
10-100 |
沙氏葡萄 糖琼脂 |
定量 |
PR≥0.7 |
白色菌落 |
黑曲霉菌 |
CMCC(F)98003 |
10-100 |
PR≥0.7 |
有黑色孢子 |
||
酵母菌 |
CMCC(F)98002 |
10-100 |
PR≥0.7 |
白色菌落 |
图1 沙氏葡萄糖琼脂微生物质控结果
备注:a:白色念珠菌,b:黑曲霉菌,c:酵母菌
注:为加强培养基选择性,每升培养基可加入0.05g氯霉素和0.5g放线菌酮。
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