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Todd-Hewitt琼脂培养基原理和使用方法

张辉
录入时间:2022-6-1 15:44:52 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

  用于链球菌的分离培养。

  细菌蛋白胨、牛心浸粉提供氮源、碳源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;氯化钠用于维持细胞渗透压;碳酸钠和磷酸氢二钠提供无机盐以及作为缓冲剂维持培养基的pH;琼脂作为培养基的凝固剂。


二、培养基配方(g/L):

细菌蛋白胨

20.0

牛心浸粉

3.1

碳酸钠

2.5

葡萄糖

2.0

氯化钠

2.0

磷酸氢二钠

0.4

琼脂

15.0

pH值7.8±0.2(25℃)


三、试验方法:

  1. 称取本品45.0 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,备用。

  2. 制备质控菌液;

  3. 选择合适稀释度的质控菌液100 μL,均匀涂布于待测培养基上,用TSA琼脂做对照培养基,计算回收率;

  4. 放置36±1℃需氧培养24-48小时,记录试验结果。


四、试验结果判断:

  接种以下质控菌株,放置于36±1℃需氧培养24-48小时。

质控菌株

菌株编号

接种量

(CFU)

回收率

生长情况

其他特征

溶血性链球菌

CMCC(B) 32210

10-100

≥70%

+++

白色小菌落

粪链球菌

ATCC 29212

10-100

≥70%

+++

白色小菌落

金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

10-100

≥70%

+++

乳白色大菌落

化脓性链球菌

ATCC 19615

10-100

≥70%

+++

白色小菌落



图1 Todd-Hewitt琼脂培养基微生物质控结果


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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