一、试验原理:
用于链球菌的分离培养。
细菌蛋白胨、牛心浸粉提供氮源、碳源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;氯化钠用于维持细胞渗透压;碳酸钠和磷酸氢二钠提供无机盐以及作为缓冲剂维持培养基的pH;琼脂作为培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L):
细菌蛋白胨 |
20.0 |
牛心浸粉 |
3.1 |
碳酸钠 |
2.5 |
葡萄糖 |
2.0 |
氯化钠 |
2.0 |
磷酸氢二钠 |
0.4 |
琼脂 |
15.0 |
pH值7.8±0.2(25℃) |
三、试验方法:
1. 称取本品45.0 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,备用。
2. 制备质控菌液;
3. 选择合适稀释度的质控菌液100 μL,均匀涂布于待测培养基上,用TSA琼脂做对照培养基,计算回收率;
4. 放置36±1℃需氧培养24-48小时,记录试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置于36±1℃需氧培养24-48小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 (CFU) |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
溶血性链球菌 |
CMCC(B) 32210 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色小菌落 |
粪链球菌 |
ATCC 29212 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色小菌落 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
乳白色大菌落 |
化脓性链球菌 |
ATCC 19615 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色小菌落 |
图1 Todd-Hewitt琼脂培养基微生物质控结果
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