一、试验原理：
用于链球菌的分离培养。
细菌蛋白胨、牛心浸粉提供氮源、碳源、维生素和生长因子；葡萄糖提供碳源；氯化钠用于维持细胞渗透压；碳酸钠和磷酸氢二钠提供无机盐以及作为缓冲剂维持培养基的pH；琼脂作为培养基的凝固剂。
二、培养基配方（g/L）：
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细菌蛋白胨 |
20.0 |
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牛心浸粉 |
3.1 |
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碳酸钠 |
2.5 |
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葡萄糖 |
2.0 |
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氯化钠 |
2.0 |
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磷酸氢二钠 |
0.4 |
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琼脂 |
15.0 |
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pH值7.8±0.2（25℃） |
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三、试验方法：
1. 称取本品45.0 g，加热溶解于1000 mL蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15分钟，备用。
2. 制备质控菌液；
3. 选择合适稀释度的质控菌液100 μL，均匀涂布于待测培养基上，用TSA琼脂做对照培养基，计算回收率；
4. 放置36±1℃需氧培养24-48小时，记录试验结果。
四、试验结果判断：
接种以下质控菌株，放置于36±1℃需氧培养24-48小时。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 （CFU） |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
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溶血性链球菌 |
CMCC(B) 32210 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色小菌落 |
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粪链球菌 |
ATCC 29212 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色小菌落 |
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金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
乳白色大菌落 |
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化脓性链球菌 |
ATCC 19615 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色小菌落 |
图1 Todd-Hewitt琼脂培养基微生物质控结果
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