一、用途及原理
该培养基用于副溶血性弧菌的糖类分解试验。
蛋白胨、牛肉浸粉为细菌生长提供基本营养,30g/L的氯化钠维持与海水相近的渗透压,有利于弧菌的生长,溴甲酚紫为酸碱指示剂,酸性条件下为黄色,碱性条件为紫红色,若细菌可分解相应的糖类产酸,导致培养基pH下降,就会观察到培养基变黄的现象,即为糖发酵阳性,若细菌不能分解相应的糖产酸,培养基仍为紫红色。
二、培养基配方(g/L)
蛋白胨 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
氯化钠 |
30.0 |
溴甲酚紫 |
0.04g |
糖(补加) |
10.0 |
pH |
7.0±0.2 |
三、配制方法
称取本品43.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,按1%量加入糖类(如若要做蔗糖发酵试验,按照10g/L的量添加蔗糖即可),分装试管,112℃灭菌15min,备用。
注:若要观察产气,可在试管中加入小倒管。
四、生长现象及结果观察
分别在培养基中加入蔗糖和阿拉伯糖,接种以下质控菌株,在36±1℃下培养18-24小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
糖发酵 |
接种量/CFU |
生长现象 |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
蔗糖 |
>5000 |
阴性,紫色 |
霍乱弧菌 |
非O1 |
蔗糖 |
>5000 |
阳性,变黄 |
溶藻弧菌 |
ATCC33847 |
蔗糖 |
>5000 |
阳性,变黄 |
创伤弧菌 |
ATCC27562 |
蔗糖 |
>5000 |
阴性,紫色 |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
阿拉伯糖 |
>5000 |
阳性,变黄 |
霍乱弧菌 |
非O1 |
阿拉伯糖 |
>5000 |
阴性,紫色 |
溶藻弧菌 |
ATCC33847 |
阿拉伯糖 |
>5000 |
阴性,紫色 |
创伤弧菌 |
ATCC27562 |
阿拉伯糖 |
>5000 |
阴性,紫色 |
图1左侧1-4支为蔗糖发酵试验,5-8支为阿拉伯糖发酵试验
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