一、用途
用于厌氧亚硫酸盐还原杆菌的试管计数。
二、原理
蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质;无水亚硫酸钠可被还原产生硫化氢;琼脂是培养基凝固剂。铁屑与培养基中氧气结合形成一个厌氧环境。
三、培养基成分(g/L)
蛋白胨 |
10.0 |
无水亚硫酸钠 |
1.0 |
琼脂 |
20.0 |
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
四、操作步骤
1、称取本品31.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,每管10-15ml,并与各试管内加入适量的混铁粉或铁屑,121℃高压灭菌20分钟,备用。
2、制备质控菌液。
3、趁热将样品加入试管中,颠倒数次,在沸水或蒸汽柜中放置15min(加热过程中也需颠倒试管数次),加热后迅速用水冷却试管,待试管内培养基完全凝固后,将试管预热至50-55℃厌氧培养48h。
五、实验结果
接种以下质控菌株,50-55℃厌氧培养48小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
产气荚膜梭菌 |
ATCC13124 |
/ |
良好 |
形成黑色球形区域 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
良好 |
未变黑 |
注:a:产气荚膜梭菌;b:大肠埃希氏菌
方法的局限性
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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