乳及乳制品样品制备要求（二）

  ISO 6887-5《微生物检验用测试样品,初始稀释液和十倍稀释液的制备第5部分:乳及乳制品制备的特殊要求》中另有一些制备要求如下:

  1）酸性乳制品检测时应确保将悬浮液的pH值调节回中性,建议在稀释液中加入pH指示剂,以避免灭菌pH探针的使用。如有需要,应添加NaOH溶液直至指示剂变色。当使用缓冲稀释液时,通常须添加NaOH溶液以增进碱性成分的缓冲容量。NaOH溶液的浓度取决于待测产品的酸度,最适宜的浓度(如0.1mol/L或1mol/L)是与稀释液仍接近1∶9比率的浓度。

  2）高脂肪含量(＞20%)的乳制品检测时需在稀释液中添加1g/L~10g/L的乳化剂.如吐温80等。添加量根据脂含量水平而定﹐例如脂含量40%的添加4g/L乳化剂。

  3）几种特定乳制品:

  ① 黄油,称取10g的试料置于一无菌容器内,将容器放入45℃水浴中，直至试料完全融化。加入预热至45℃的 90mL通用稀释液进行混合,建议使用蠕动式均质器。

  若检测方法中要求仅使用稀释液的水相部分。则应称取50g的黄油试料 (其中水的体积/质量百分数为W%),加入预热至45℃的稀释液,加入量为[50-（50×w%）]mL这时，稀释液水相的1mL即相当于1g黄油。例如:50g黄油，含水的体积/质量百分数为16%，即8mL, 应加入[50-(50×16%)]=42ml的稀释液,水浴融化试料后，取出并振摇混合，静置分层不要超过15min,必要时用刮刀或玻璃棒除去脂肪层。如有必要分离油、水相,则将融化的试料转移到无菌离心管中(或者直接在离心管中融化),离心后去除脂肪层,用吸管吸取底层的水相，1mL即相当于1g黄油。

  ② 冰淇淋称取10g试料至烧瓶或无菌均质袋,加入90ml室温的通用稀释液并混匀,期间试料会融化。

  ③ 蛋黄酱、甜点和甜乳酪(pH>5)称取10g试料至含玻璃珠的烧瓶中,加入90mL室温的通用稀释液﹐振摇使样品分散。也可使用蠕动式均质器及均质袋,则无需加玻璃珠。

  ④ 发酵乳和酸乳酪(pH<5)称取10g试料至含玻璃珠的烧瓶中,加入90mL室温的pH7.5±0.2的缓冲蛋白胨水或磷酸盐缓冲液。手摇混合,或使用蠕动式均质器及均质袋,则无需加玻璃珠。

  ⑤ 乳基婴儿食品先反复振摇和翻转,使密闭容器内容物充分混匀。若试验样品在一个原装未开封容器中太满而不能充分混匀时,可以将其移出至一个更大些的容器中进行混合。打开容器,用刮刀取出规定量的试料,取样完毕后立即密封容器。

  称取10g 试料,加入含通用稀释液的稀释瓶中,含淀粉的样品应使用特定稀释液;若不易获得均匀的悬浮液﹐可先将稀释液预热至45℃,并预先在稀释瓶中加人玻璃珠以使样品更好地溶解复原。若使用了预热的稀释液,此附加操作应在报告中提及。为充分溶解样品,可缓缓涡旋浸湿样粉,然后手摇样品瓶约25次,振摇幅度300mm,时间约7s;或使用蠕动式均质器。然后将稀释瓶放置5min,不时摇动。淀粉含量较高的产品在制备初始悬浮液时可能有黏稠度过高的问题,可采用含α淀粉酶的通用稀释液来减少悬浮液的黏稠度,或使用两倍量的稀释液进行稀释,但随后的检测中要将此稀释液的浓度计算在内。

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